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兔抗金黄地鼠酶标抗体的制备及应用
引用本文:刘先菊,林树柱,杨帆,佟巍,刘云波.兔抗金黄地鼠酶标抗体的制备及应用[J].实验动物与比较医学,2012(1):84-87.
作者姓名:刘先菊  林树柱  杨帆  佟巍  刘云波
作者单位:中国医学科学院实验动物研究所 卫生部实验动物检测中心, 北京100021;中国医学科学院实验动物研究所 卫生部实验动物检测中心, 北京100021;中国医学科学院实验动物研究所 卫生部实验动物检测中心, 北京100021;中国医学科学院实验动物研究所 卫生部实验动物检测中心, 北京100021;中国医学科学院实验动物研究所 卫生部实验动物检测中心, 北京100021
基金项目:中央级公共性科研院所基本科研业务费专项资金项目(项目编号:DWS200906)。
摘    要:目的纯化金黄地鼠血清IgG,制备兔抗金黄地鼠酶标抗体(IgG-HRP),开展金黄地鼠仙台病毒的初步检测。方法采用亲和层析纯化法纯化金黄地鼠IgG, 用SDS- PAGE电泳测定IgG纯度并制备兔抗金黄地鼠IgG抗体(second antibody,Ab2);用免疫双扩散法检测抗血清效价后,再用亲和层析纯化抗血清IgG(Ab2);采用改良过碘酸钠标记法制备兔抗金黄地鼠酶标抗体(rabbit anti-hamster IgG-HRP);用直接ELISA 和 Western-blot法对兔抗金黄地鼠IgG酶标抗体进行工作浓度测定;应用金黄地鼠酶标抗体对金黄地鼠仙台病毒进行酶免检测(IEA)。结果金黄地鼠血清IgG纯度达95%;兔抗金黄地鼠IgG抗体(Ab2)免疫双扩散效价为1:64;兔抗金黄地鼠IgG-HRP经直接ELISA 和 Western-Blot测定工作浓度分别为1∶5000和1∶2000;酶免(IEA)效价为1∶2000。 结论高效快速纯化了金黄地鼠IgG,制备了金黄地鼠IgG-HRP,为金黄地鼠病原微生物的血清学检测提供了条件。

关 键 词:金黄地鼠    IgG纯化    酶标抗体

Preparation and application of the rabbit anti-hamster IgG-HRP
LIU Xian-ju,LIN Shu-zhu,YANG Fan,DONG Wei and LIU Yun-bo.Preparation and application of the rabbit anti-hamster IgG-HRP[J].Laboratory Animal and Comparative Medicine,2012(1):84-87.
Authors:LIU Xian-ju  LIN Shu-zhu  YANG Fan  DONG Wei and LIU Yun-bo
Institution:Monitoring Center of Laboratory Animals, Ministry of Health; Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Science CAMS and Peking Union Medical College PUMC, Beijing 100021, China;Monitoring Center of Laboratory Animals, Ministry of Health; Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Science CAMS and Peking Union Medical College PUMC, Beijing 100021, China;Monitoring Center of Laboratory Animals, Ministry of Health; Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Science CAMS and Peking Union Medical College PUMC, Beijing 100021, China;Monitoring Center of Laboratory Animals, Ministry of Health; Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Science CAMS and Peking Union Medical College PUMC, Beijing 100021, China;Monitoring Center of Laboratory Animals, Ministry of Health; Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Science CAMS and Peking Union Medical College PUMC, Beijing 100021, China
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