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大鼠细小病毒H-1株培养方法的建立
引用本文:刘先菊,佟巍,张丽芳,王艳蓉,高子琪,仉惠敏,荣蓉,刘云波.大鼠细小病毒H-1株培养方法的建立[J].实验动物与比较医学,2011,19(6).
作者姓名:刘先菊  佟巍  张丽芳  王艳蓉  高子琪  仉惠敏  荣蓉  刘云波
作者单位:中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部实验动物检测中心,北京,100021
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目;项目
摘    要:目的 建立用大鼠胶质瘤细胞系(Rat glial cell line C6)替代大鼠原代胚细胞( primary rat embryo cells,RE)培养大鼠细小病毒(Toolan virus,H-1)的方法.方法 将0.8mLH-1病毒接种C6细胞(75T培养瓶,细胞接种量为2×105/mL,培养过夜),待细胞病变CPE达++~+++时,用免疫荧光(FITC)鉴定所培养病毒的抗原,用血球凝集试验(HA)测定培养物上清效价,用DNA测序鉴定所培养的病毒,用96孔板培养法测定H-1病毒的TCID50.结果H-1在接种到C6细胞的第3~4天,细胞发生明显的病变,CPE可达++++,FITC鉴定呈H-1抗原阳性,病毒的培养上清中HA效价为1:320.测序结果表明:该病毒序列与NCBI中H-1序列同源性达99%,确定为H-1病毒.收获的H-1的TCID50为103.2/0.1 mL.结论用大鼠胶质瘤细胞系(C6)可以替代大鼠原代胚细胞(RE)进行大鼠细小病毒的培养.

关 键 词:细小病毒  大鼠胶质瘤细胞  大鼠原代胚细胞  免疫荧光试验  血球凝集试验

Establishment of a culture method for Toolan virus (H-1)
LIU Xian-ju,TONG Wei,ZHANG Li-fang,WANG Yan-rong,GAO Zi-qi,ZHANG Hui-min,RONG Rong,LIU Yunbo.Establishment of a culture method for Toolan virus (H-1)[J].Laboratory Animal and Comparative Medicine,2011,19(6).
Authors:LIU Xian-ju  TONG Wei  ZHANG Li-fang  WANG Yan-rong  GAO Zi-qi  ZHANG Hui-min  RONG Rong  LIU Yunbo
Abstract:
Keywords:
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