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OATP-C分子阳离子赖氨酸-49突变体削弱其底物摄取能力
引用本文:杨聪,陈文生,邓国宏,汪荣泉,肖天利. OATP-C分子阳离子赖氨酸-49突变体削弱其底物摄取能力[J]. 中华消化外科杂志, 2007, 6(3): 227-230
作者姓名:杨聪  陈文生  邓国宏  汪荣泉  肖天利
作者单位:1. 400038,重庆,第三军医大学西南医院全军消化病研究所、重庆市消化病研究所
2. 400038,重庆,第三军医大学西南医院感染科
基金项目:国家自然科学基金主任基金项目(30440015);重庆市自然科学基金(CSTC-2005BB5043)
摘    要:目的研究人肝脏特异的有机阴离子转运蛋白基因OATP-C分子膜外区保守的49位阳离子赖氨酸,对其有机阴离子底物摄取能力的影响。方法从人肝脏mRNA中克隆OATP-C野生型基因全长cDNA序列,通过定点突变将高度保守的第49位赖氨酸残基突变为中性氨基酸-苏氨酸,构建其C端的GFP融合蛋白的真核表达载体,转染HEK293细胞,观察突变体的细胞膜定位能力及底物摄取功能的变化。结果OATP-C野生型及突变体基因均能定位表达于HEK293细胞质膜;[^3H]硫酸盐雌酮底物摄取实验显示,突变体5min底物摄取量较野生型下降74.18%,浓度依赖的[^3H]硫酸盐雌酮底物摄取动力学分析表明,突变体Km增高和vmax降低。结论OATP-C蛋白膜外区第49位赖氨酸是其关键的功能氨基酸,是其重要的功能结构单位。

关 键 词:OATP-C 定点突变 底物摄取 HEK293细胞
修稿时间:2007-02-12

Mutant of OATP-C positive ion lysine-49 impairs uptaking ability of its substrate
YANG Cong,CHEN Wen-sheng,DENG Guo-hong,WANG Rong-quan,XIAO Tian-li. Mutant of OATP-C positive ion lysine-49 impairs uptaking ability of its substrate[J]. Chinese Journal of Digestive Surgery, 2007, 6(3): 227-230
Authors:YANG Cong  CHEN Wen-sheng  DENG Guo-hong  WANG Rong-quan  XIAO Tian-li
Affiliation:Institute of Digestive Disease, Southwest Hospi- tal, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China
Abstract:
Keywords:OATP-C   Site-directed mutagenesis    Substrate up-take    HEK293 cell
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