人羊水细胞中SLC25A13基因转录产物的克隆和序列分析

目的：克隆分析citrin蛋白编码基因SLC25A13在人羊水细胞中的mRNA编码区全长，并分析其转录子的序列特征，为从mRNA水平开展 Citrin 缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症（NICCD）产前诊断提供实验依据。方法：选取1例接受 citrin 缺陷病产前诊断并已证实胎儿为851del4突变携带者的羊水标本；另1例取自无 citrin 缺陷病史患者的羊水细胞标本作为正常对照。抽提体外培养的羊水细胞总RNA，逆转录合成cDNA，通过巢式PCR扩增SLC25A13 cDNA编码区全长。PCR产物克隆后测序分析。结果：从2例羊水细胞标本中成功克隆到SLC25A13 cDNA编码区全长，并发现SLCA型转录子（正常型转录子mRNA）；在正常对照样本中发现 SLCB型转录子（外显子9和10之间CAG插入）；在851del4突变携带者标本中发现SLCC 型转录子（外显子5~11缺失），未发现含851del4突变等位基因转录产物。结论：SLC25A13 cDNA编码区全长可以从羊水细胞中扩增获得，而外显子5~11缺失型转录子是SLC25A13基因一种新的转录子。在正常对照和包含851del4突变的杂合子胎儿SLC25A13基因转录产物中正常mRNA占据优势，提示胎儿无罹患NICCD风险。这些转录特征可以为NICCD产前诊断提供实验依据。

Cloning and sequence analysis of SLC25A13 transcripts in human amniocytes