| 摘 要： | 目的探讨透骨消痛胶囊抑制脂多糖(LPS)诱导的软骨细胞炎症反应作用机制。方法对4周龄雄性SD大鼠采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞并进行体外培养,将软骨细胞分为空白组、模型组以及透骨消痛胶囊组,空白组加入含10%胎牛血清(FBS)的低糖型Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM/LOW)2 mL,模型组加入含10 ng/mL LPS、10%FBS的DMEM/LOW培养基2 mL,透骨消痛胶囊组加入含10 ng/mL LPS、透骨消痛胶囊(300μg/mL)、10%FBS的DMEM/LOW培养基2 mL。干预8 h后,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测各组微小RNA(miRNA)-140表达变化,免疫荧光观察各组带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS)4、基质金属蛋白酶(MMP)-3表达变化,Image J分析各组平均光密度。结果与空白组相比,模型组MMP-3表达升高(P0.05)、ADAMTS4表达明显升高(P0.01);与模型组相比,透骨消痛胶囊组MMP-3表达下降(P0.05)、ADAMTS4表达明显下降(P0.01)。与空白组相比,模型组软骨细胞miRNA-140表达明显降低(P0.05);与模型组相比,透骨消痛胶囊组软骨细胞miRNA表达明显升高(P0.05)。结论透骨消痛胶囊能促进miRNA-140表达,降低ADAMTS4、MMP-3分泌,抑制炎症反应介导的软骨基质降解,从而延缓骨关节炎软骨退变。
|
