| 摘 要： | 目的探讨miRNA-4429靶向结合髓样细胞白血病-1（MCL1）对食管鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。方法采用qRT-PCR法检测食管鳞状细胞癌细胞系和食管正常上皮细胞中miRNA-4429的相对表达量。采用脂质体转染法分别将miRNA-4429模拟物和模拟物对照转染至食管鳞状细胞癌EC9706细胞，分为实验组和对照组。应用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术和Transwell小室实验等探究miRNA-4429对食管鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。构建MCL1的3''非编码区（3''UTR）野生型和突变型荧光素酶报告基因载体，应用荧光素酶报告基因实验验证MCL1是否为miRNA-4429的靶基因。采用Westernblot法检测实验组和对照组MCL1蛋白的表达水平。结果4株食管鳞状细胞癌细胞中miRNA-4429相对表达量均明显低于食管正常上皮细胞（均P＜0.01）；而与对照组比较，实验组细胞中miRNA-4429相对表达量显著上调（P＜0.01）。实验组细胞OD值在72、96h均明显低于对照组（均P＜0.01）；与对照组比较，实验组细胞集落形成数明显降低（P＜0.01）。与对照组比较，实验组细胞凋亡率明显升高（P＜0.01）。实验组细胞迁移数及侵袭数均明显低于对照组（均P＜0.01）。miRWalk、miRDB和miRTarBase预测结果表明，MCL1是miRNA-4429的作用靶基因。荧光素酶报告基因实验的结果表明，共转染MCL13''UTR-野生型荧光素酶报告载体后，与对照组比较，实验组荧光素酶相对活性降低（P＜0.05）；而共转染MCL13''UTR-突变型荧光素酶报告载体后，实验组与对照组荧光素酶相对活性比较差异无统计学意义（P＞0.05）。实验组MCL1蛋白表达水平明显低于对照组（P＜0.01）。结论食管鳞状细胞癌细胞株中miRNA-4429相对表达量降低，上调miRNA-4429表达可减弱食管鳞状细胞癌EC9706细胞的增殖、迁移和侵袭能力，促进细胞凋亡，其作用机制可能与靶向结合调控MCL1的表达有关。
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