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髓核细胞来源外泌体对骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化的作用
引用本文:路 康,杨 匡,李海音,周 跃,李长青. 髓核细胞来源外泌体对骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化的作用[J]. 中国脊柱脊髓杂志, 2016, 0(10): 933-938
作者姓名:路 康  杨 匡  李海音  周 跃  李长青
作者单位:第三军医大学附属新桥医院 400037重庆市,第三军医大学附属新桥医院 400037重庆市,第三军医大学附属新桥医院 400037重庆市
基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:81572208)
摘    要:目的:探讨人髓核细胞(NPCs)外泌体对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的作用。方法:取腰椎间盘突出症患者手术切除的髓核组织,体外分离培养人NPCs,采用差速离心法提取NPCs的外泌体,利用透射电镜及Western blot对外泌体进行大小形态及标志蛋白的检测,同时用PKH67荧光染料标记外泌体后与BMSCs共孵育0.5h、2h、4h,在激光共聚焦显微镜下观察BMSCs对NPCs外泌体的摄取情况;取人BMSCs经NPCs外泌体诱导3d、7d、10d、14d后应用RT-PCR检测BMSCs中蛋白聚糖(ACAN)、SOX-9、Ⅱ型胶原(COL2A1)、角蛋白19(KRT19)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的m RNA表达情况。结果:提取的人NPCs外泌体为直径为30~100nm的圆形或椭圆形结构,其表达CD63和Tsg101,不表达Calnexin蛋白。经PKH67标记的NPCs外泌体可以被BMSCs摄取;经NPCs外泌体诱导后7d开始BMSCs中的ACAN、SOX-9、COL2A1、KRT19及HIF-1α基因m RNA表达均显著性高于未经诱导的BMSCs(P0.05)。结论:在体外实验中,人NPCs可以分泌外泌体并被BMSCs所摄取,诱导BMSCs分化为髓核样细胞,可为椎间盘退变的组织工程修复提供更为简单有效的NPCs来源。

关 键 词:椎间盘退变;外泌体;髓核细胞;骨髓间充质干细胞
收稿时间:2016-08-04
修稿时间:2016-09-02

Exosomes derived from nucleus pulposus cells induced bone marrow mesenchymal stem cells into nucleus pulposus like cells
LU Kang,YANG Kuang,LI Haiyin. Exosomes derived from nucleus pulposus cells induced bone marrow mesenchymal stem cells into nucleus pulposus like cells[J]. Chinese Journal of Spine and Spinal Cord, 2016, 0(10): 933-938
Authors:LU Kang  YANG Kuang  LI Haiyin
Affiliation:Exosomes derived from nucleus pulposus cells induced bone marrow mesenchymal stem cells into nucleus pulposus like cells
Abstract:
Keywords:Intervetebral disc degeneration   Exosomes   Mesenchymal stem cells   Nucleus pulposus cells
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