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皮质酮预处理对脂多糖激活小胶质细胞NLRP3炎症小体的调节作用及鸡豆黄素A的保护作用
作者姓名:王俊  杨丽  李维祖  尹艳艳
作者单位:安徽医科大学基础医学院药理学教研室,合肥 230032
摘    要:目的:研究皮质酮(CORT)预处理对脂多糖(LPS)激活小胶质细胞的NLRP3炎症小体是否有调节作用,鸡豆黄素A(BiochaninA)是否抑制其作用。方法:将常规培养的BV2细胞分为5组: Control组、CORT(50 ng/ml)组、LPS(10μg/ml)组、LPS(10μg/ml)+CORT(50 ng/ml)组、LPS(10μg/ml)+CORT(50 ng/ml)+ BiochaninA(5μM)组。除对照组外,各组先将入CORT(50 ng/ml)孵育2h,然后各组加入相应浓度的LPS(10μg/ml)和BiochaninA(5μM)共同孵育36h。采用MTT法检测细胞活力;采用DCFH-DA探针法检测ROS;采用Western-blot法检测各组细胞中5-HTT、ASC、Caspase-1、NLRP3、IL-6、GR、IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达水平。结果:与CORT(50 ng/ml)组和LPS(10μg/ml)组比较,CORT(50 ng/ml)+LPS(10μg/ml)组细胞活力增加,ROS的表达量也更高;与CORT(50 ng/ml)+LPS(10μg/ml)组比较,CORT(50 ng/ml)+ LPS(10μg/ml)+ BiochaninA(5μM)组细胞的活力降低,ROS的表达量也较低。Western-blot检测显示与CORT(50 ng/ml)组和LPS(10μg/ml)组比较,CORT(50 ng/ml)+LPS(10μg/ml)组细胞的5-HTT、ASC、Caspase-1、NLRP3、IL-6、GR、IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达水平均增加;与CORT(50 ng/ml)+LPS(10μg/ml)组比较,CORT(50 ng/ml)+ LPS(10μg/ml)+ BiochaninA(5μM)组上述蛋白表达量低。结论:CORT预处理对LPS激活小胶质细胞NLRP3炎症小体的表达有上调作用,而BioA可以NLRP3炎症小体相关蛋白的表达。

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