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嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用研究
引用本文:高正琴,岳秉飞,贺争鸣.嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用研究[J].现代检验医学杂志,2012,27(1).
作者姓名:高正琴  岳秉飞  贺争鸣
作者单位:中国食品药品检定研究院,北京,100050
摘    要:目的 建立嗜肺巴斯德菌的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法.方法 针对嗜肺巴斯德菌16SrRNA基因设计特异性引物和探针,建立嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异度、敏感度和稳定性.对2008~2011年采集的1 680份样本进行检测.结果 嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法具有高度特异性,对多杀巴斯德菌、产气巴斯德菌、支气管鲍特杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌均无交叉反应,检测灵敏度达22拷贝.标准曲线显示备浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999,斜率为-3.488,PCR效率为100%.荧光定量PCR检测1 680份样本,检出137份嗜肺巴斯德菌阳性.该方法可直接从样本中特异性地检出嗜肺巴斯德菌.结论 TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有灵敏、特异、稳定的特性,适用于嗜肺巴斯德菌的快速检测.

关 键 词:嗜肺巴斯德菌  小沟结合物探针  实时荧光定量PCR  检测

Development and Application of TaqMan MGB Probe Real-time Fluorescence Quantitative PCR for Rapid Detection of Pasteurella Pneumotropica
GAO Zheng-qin , YUE Bing-fei , HE Zheng-ming.Development and Application of TaqMan MGB Probe Real-time Fluorescence Quantitative PCR for Rapid Detection of Pasteurella Pneumotropica[J].Journal of Modern Laboratory Medicine,2012,27(1).
Authors:GAO Zheng-qin  YUE Bing-fei  HE Zheng-ming
Abstract:
Keywords:
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