耳蜗螺旋动脉上连接蛋白43与老年性耳聋的关系研究

背景　老年性耳聋是指随着年龄的增长而缓慢出现听力阈值增加的疾病，耳蜗螺旋动脉（SMA）在维持耳蜗血供和听力方面发挥重要的作用。连接蛋白43（Cx43）在血管壁上广泛表达，对血管的舒缩功能有着重要的影响，但Cx43在SMA上的表达与老年性耳聋的关系尚不清楚。目的　以D-半乳糖（D-gal）诱导的老年性耳聋豚鼠为研究对象，研究SMA上Cx43与老年性耳聋的关系。方法　2018年5月，将无耳疾3月龄SPF级豚鼠36只随机分为Control组、NS组、D-gal组，各12只。D-gal组在正常饲养的基础上，颈背部皮下注射D-gal 500 mg•kg-1•d-1；NS组在正常饲养的基础上，颈背部皮下注射0.9%氯化钠溶液（体积等同D-gal组）；对照组正常饲养，不做任何处理；共6周。取Control组豚鼠交配产下的3只新生豚鼠，处死分离SMA，贴壁法培养原代SMA血管平滑肌细胞（VSMCs），鉴定后取第3代SMA VSMCs制备细胞衰老模型：对照组为正常培养 48 h；衰老组为在正常培养基础上加入30 g/L D-gal培养48 h；AAP10组为在正常培养的基础上加入100 nmol/L AAP10预处理，而后加入30 g/L D-gal培养48 h。采用Morris水迷宫测试实验检测Control组、NS组、D-gal组豚鼠测试第1、2、3、4、5天逃避潜伏期及第6天穿越平台的次数；比较Control组、NS组、D-gal组豚鼠听性脑干反应（ABR）阈值，肝组织、脑组织、血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）水平，SMA上Cx43 mRNA及Cx43表达水平。比较对照组、衰老组、AAP10组VSMCs内SOD活性、MDA水平，VSMCs中Cx43表达水平。结果　组别与时间在豚鼠逃避潜伏期中存在交互作用（F交互=6.99，P交互<0.05）；组别与时间在豚鼠逃避潜伏期中主效应显著（F组间=53.43，F时间=38.15；P组间<0.05，P时间<0.05）。D-gal组豚鼠测试第3、4、5天逃避潜伏期长于Control组和NS组（P<0.05）；D-gal组豚鼠测试第6天穿越平台次数少于Control组和NS组（P<0.05）。D-gal组豚鼠ABR阈值高于Control组和NS组，肝组织、脑组织、血清SOD活性低于Control组和NS组，肝组织、脑组织、血清MDA水平高于Control组和NS组（P<0.01）。衰老组VSMCs内SOD活性低于对照组和AAP10组，MDA水平高于对照组和AAP10组（P<0.01）；AAP10组VSMCs内SOD活性低于对照组，MDA水平高于对照组（P<0.01）。D-gal组豚鼠SMA上Cx43 mRNA及Cx43表达水平低于Control组和NS组（P<0.01）。衰老组VSMCs中Cx43表达水平低于对照组和AAP10组（P<0.05）；AAP10组VSMCs中Cx43表达水平低于对照组（P<0.05）。结论　D-gal致衰老情况下豚鼠SMA上Cx43表达水平的变化可能与老年性耳聋有关，为临床后续的研究方向奠定了基础。

Correlation between Connexin 43 on Spiral Modiolar Artery and Presbycusis

SI Chao;ZHANG Zhiping;FAN Zhiru;ZHANG Liang;LI Li;SI Junqiang;LI Xinzhi;MA Ketao(Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases,Shihezi University School of Medicine,Shihezi 832000,China;Department of Physiology,Shihezi University School of Medicine,Shihezi 832000,China;Department of Otolaryngology,the First Affiliated Hospital of the Medicine College,Shihezi University,Shihezi 832000,China;Department of Pathophysiology,Shihezi University School of Medicine,Shihezi 832000,China)