| 针对人SND1基因两个AUG的细胞应激分析 |
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| 引用本文： | 高星杰,何津岩,葛林,张毅,付雪,尹洁,张纬,史雪彬,苏征,姚智,杨洁. 针对人SND1基因两个AUG的细胞应激分析[J]. 天津医药, 2014, 42(7): 625 |
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| 作者姓名： | 高星杰 何津岩 葛林 张毅 付雪 尹洁 张纬 史雪彬 苏征 姚智 杨洁 |
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| 作者单位： | 1. 天津医科大学基础医学研究中心2. 天津医科大学生理教研室3. 天津医科大学基础医学院免疫学教研室4. 天津医科大学免疫教研室5. 生化教研室6. 天津医科大学基础医学院7. 8. 天津医科大学 |
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| 摘 要： | 【摘要】目的 针对人SND1基因2个蛋白翻译起始密码子AUG构建真核表达质粒pCMV-N-Flag-SND1-No1/ 2，并分析2个AUG在SND1应激颗粒形成中的作用。方法 以SND1全长转录本为模板，PCR法扩增含BamHⅠ和 EcoRⅠ酶切位点的目的基因SND1-No1/2，双酶切法分别酶切目的基因片段和线性pCMV-N-Flag，以T4-DNA连接酶将两者连接成pCMV-N-Flag-SND1-No1/2重组质粒，然后将构建的重组质粒转染入HeLa细胞内，以Western印迹法检测Flag标签（DYKDDDDK）与SND1-No1/2的融合表达，最后以细胞免疫荧光实验检测在氧化应激状态下Flag SND1-No1/2融合蛋白与内源性SND1应激颗粒的胞内共定位情况。结果以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒无误，Western印迹结果检测到融合蛋白Flag-SND1-No1/2的表达；细胞免疫荧光结果显示Flag-SND1-No1/2 均可与内源性SND1应激颗粒共定位。结论重组pCMV-N-Flag-SND1-No1/2质粒构建成功，SND1基因第1个 AUG的缺失并不影响SND1应激颗粒的形成。
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| 关 键 词： | SND1 AUG 融合蛋白 应激颗粒 |
| 收稿时间： | 2014-02-11 |
| 修稿时间： | 2014-03-19 |
Analysis of Cellular Stress Response in Two AUG of Human SND1 Gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SND1 AUG fusion protein stress granules |
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