G蛋白偶联受体40在游离脂肪酸影响小鼠胰岛NIT-1细胞脂性凋亡中的作用

目的： 探讨G蛋白偶联受体40（GPR40）是否介导游离脂肪酸(FFAs)对小鼠胰岛NIT-1细胞脂性凋亡的影响及其可能机制。方法: 观察棕榈酸、油酸(500 μmol/L, 48 h) 对NIT-1细胞凋亡的影响，用Hoechst 33342染色、TUNEL及流式细胞仪检测凋亡。并利用siRNA技术抑制GPR40在NIT-1细胞表达，观察棕榈酸、油酸对GPR40表达抑制细胞脂性凋亡的影响，行Western blotting观察Bcl-2、Bax和p-c-Jun表达。结果: 棕榈酸长期作用可诱导NIT-1细胞凋亡；而油酸可抑制棕榈酸对NIT-1细胞的诱导凋亡作用。 抑制GPR40表达后，空转组、control siRNA、GPR40 siRNA转染细胞分别予棕榈酸孵育48 h，3组间细胞凋亡率差异无显著；3组细胞分别予棕榈酸、油酸共孵育48 h，GPR40 siRNA转染细胞凋亡率明显高于空转组细胞，差异显著（P<0.05），Western blotting显示这一过程伴随c-Jun磷酸化水平下降、Bcl-2、Bax表达无明显变化。结论: GPR40未参与饱和脂肪酸诱导的β细胞凋亡，而介导了不饱和脂肪酸对脂性凋亡的抑制作用，c-Jun可能参与这一过程。提示GPR40 参与调节β细胞适应性，为探讨肥胖和T2DM的关系提供了新的线索。