急性白血病Bcl-2反义寡核苷酸基因治疗的实验研究 |
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引用本文: | 林艳娟.急性白血病Bcl-2反义寡核苷酸基因治疗的实验研究[J].福建医科大学学报,1998(3). |
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作者姓名: | 林艳娟 |
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作者单位: | 福建医科大学附属协和医院,福建省血液病研究所 |
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摘 要: | 目的选用20ntBcl-2反义硫代磷酸寡核苷酸(As-Ps-ODN,ASPO),并以其正义寡核苷酸(SPO)为对照做如下问题探讨:(1)普通剂量(5~20μmol)ASPO对HL60细胞、正常及缺铁性贫血患者骨髓细胞及急性白血病病人骨髓细胞或外周白血病细胞(幼稚细胞≥85%)的作用;(2)大剂量(160μmol)正义或反义寡核苷酸对HL60细胞作用的特点,并通过ASPO引起HL60细胞Bcl-2蛋白表达变化和SPO对HL60细胞毒性的变化,寻找可能的最佳效应剂量和最小毒性剂量;(3)ASPO联合化疗药物对HL60细胞和原代急性白血病细胞的作用。方法台盼蓝拒染试验和克隆培养测定细胞的生长能力;免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测P26Bcl-2蛋白表达,RT-PCR法检测Bcl-2mRNA(Bcl-2/β-actin)相对水平;光、电镜下观察凋亡细胞形态,吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率,DNA提取及电泳观察凋亡细胞DNA降解片段的形成;MTT法检测PS-ODN及化疗药物的细胞毒作用。结果(1)普通剂量的ASPO即能降低HL60细胞及白血病细胞Bcl-2mRNA的表达,并抑制HL60细胞及18/20例白血病细
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关 键 词: | Bcl-2癌基因 反义硫代磷酸寡核苷酸 HL60细胞系 急性白血病 |
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