建立以HIF-1α为靶标的高通量筛选防治动脉粥样硬化先导化合物的细胞模型 |
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引用本文: | 钱俞君,秦春霞,孙莉莉,丁华敏,李铁军.建立以HIF-1α为靶标的高通量筛选防治动脉粥样硬化先导化合物的细胞模型[J].药学实践杂志,2019,37(1):27-31. |
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作者姓名: | 钱俞君 秦春霞 孙莉莉 丁华敏 李铁军 |
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作者单位: | 上海市浦东新区浦南医院药剂科, 上海 200125,上海市浦东新区浦南医院药剂科, 上海 200125,上海市浦东新区浦南医院药剂科, 上海 200125,上海市浦东新区浦南医院药剂科, 上海 200125,上海市浦东新区浦南医院药剂科, 上海 200125 |
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基金项目: | 上海市浦东新区科技发展基金(PKJ2015-Y26);上海市浦东新区卫生和计划生育委员会学科建设(PWZbr2017-16) |
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摘 要: | 目的 建立一个高通量筛选防治动脉粥样硬化先导化合物的体外细胞模型。方法 克隆HIF-1α低氧反应元件(hypoxia response element,HRE)至荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Enhancer,构建荧光素酶表达载体pGL3-HIF-1α-HRE,转染人单核细胞THP-1并筛选稳定表达细胞株THP-1-HIF-1α-HRE。结果 Real Time-PCR检测表明低氧培养可以有效上调THP-1-HIF-1α-HRE细胞HIF-1α蛋白表达和荧光素酶活性,而洛伐他汀和姜黄素预处理可以有效抑制低氧引起的THP-1-HIF-1α-HRE细胞内HIF-1α蛋白表达及荧光素酶活性。结论 成功建立了筛选抗动脉粥样硬化的先导化合物体外高通量细胞模型THP1-HIF-1α-HRE。
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关 键 词: | 缺氧诱导因子1α 高通量 荧光素酶活性 动脉粥样硬化 筛选 |
收稿时间: | 2018/6/11 0:00:00 |
修稿时间: | 2018/9/25 0:00:00 |
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