加味四妙勇安汤颗粒剂含药血清对兔肺泡巨噬细胞PI3K/Akt信号通路的影响

目的观察加味四妙勇安汤颗粒剂含药血清对CP-Rb001兔肺泡巨噬细胞PI3K/Akt信号通路的影响,探讨其治疗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用高、中、低剂量加味四妙勇安汤颗粒剂溶于水灌胃干预日本大耳白兔,制备含药血清;经MTT法观察各浓度含药血清对细胞增殖的影响后,选择各剂量浓度为20%的含药血清干预体外培养的兔肺泡巨噬细胞,采用荧光定量PCR方法检测自噬相关基因Beclin-1、LC3 mRNA表达水平;Westernblot检测Beclin-1、LC3、Akt、p-Akt和mTOR、p-mTOR蛋白的表达变化。结果与正常对照组血清相比,在10%~40%的浓度范围内加味四妙佤勇安汤颗粒剂含药血清的OD值与正常对照组的OD值比较无明显差异(P>0.05);加味四妙勇安汤颗粒剂各剂量组含药血清Beclin-1、LC3mRNA及蛋白的表达均显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而p-Akt和p-mTOR蛋白的表达显著低于正常对照组(P<0.05),Akt及mTOR蛋白表达与正常对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论加味四妙勇安汤颗粒剂含药血清具有抗动脉粥样硬化的作用,可能通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活,诱导巨噬细胞的自噬活动,减少斑块内巨噬细胞的浸润,进而达到稳定动脉粥样硬化易损斑块的目的。