栀子苷抑制甲型流感病毒感染细胞中Toll样受体7/核因子-κB信号通路

目的 研究栀子苷对甲型流感病毒H3N2感染所致的Toll样受体7(Toll-like receptors7,TLR7)及其介导的细胞内转录因子核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)活性及前炎症细胞因子TNF-α和IL-6释放的影响,以探讨栀子苷干预甲型流感病毒作用的分子生物学机制.方法 甲型流感病毒H3N2作为刺激因素,利用双荧光素酶顺式报告系统和免疫荧光实验检测栀子苷对NF-κB转录活性及NF-κB核转位的影响.RT-PCR法进一步验证栀子苷对NF-κB上下游靶基因TLR7、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平的影响.结果 通过NF-κB双萤光素酶报告系统检测发现,与正常对照组比较,病毒感染的细胞中NF-κB荧光素酶报告活性明显升高;与病毒损伤组比较,栀子苷治疗组NF-κB荧光素酶报告活性明显受到抑制.荧光倒置显微镜下观察NF-κB p65磷酸化水平及核转位变化结果显示,病毒感染的细胞中NF-κB磷酸化水平及人核率明显升高;与病毒损伤组比较,栀子苷治疗组NF-κB磷酸化水平及入核率明显受到抑制.RT-PCR结果显示栀子苷能明显抑制病毒诱导的TLR7、TNF-α和IL-6 mRNA的高表达.结论 栀子苷可拮抗甲型流感病毒H3N2感染细胞中TLR7介导的细胞内转录因子NF-κB信号转导通路的活化,并可抑制其下游靶基因TNF-α和IL-6 mRNA的高表达水平来发挥抗病毒感染的作用.