结核分支杆菌耐利福平耐药基因的检测

目的 评估应用聚合酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）技术检测rPOB基因突变在结核分支杆菌耐利福平（RFP）耐药性测定中的应用价值。方法 采用PCR0－SSCP方法对93株结核分支杆菌临床分离株（其中药物敏感株35株，耐RFP或含耐RFP耐多药株58株）和33例耐RFP肺结核病人痰标本rPOB基因突变进行检测，并对部分常规药敏试验耐药而用PCR－SSCP未检测到rPOB基因突变的PCR扩增产物阴性菌株用双脱氧末端终止法进行测序分析。结果 以结核分支杆菌H37RV为对照，35株药物敏感株的rPOB基因PCR扩增产物258bp片段SSCP图谱正常；58株耐RFP分离株中，52株rPOB基因SSCP图谱异常，其敏感性为89．7％。SSCP图谱正常的5株耐RFP的PCR产物经测序证实，4株在531位密码子TCG→TTG，1株在526密码子CAC→TAC，1株未改变。33例耐RFP肺结核病人痰酝标本有30例PCR扩增阳性，23例SSCP图谱与H37RV株有差异，rPOB突变率为76．7％。结论 PCR－SSCP 以快速、准确地检测结核分支杆菌rPOB基因突变，该技术有望直接用于临床标本耐药性检测。

Defection of the Rifampin - Resistant Mycobacterium Tuberculosis