| TGF-β2转染关节软骨细胞的实验研究 |
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| 引用本文： | 王卫国,娄思权,佘华,夏家辉. TGF-β2转染关节软骨细胞的实验研究[J]. 中华骨科杂志, 2003, 23(7): 434-438 |
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| 作者姓名： | 王卫国 娄思权 佘华 夏家辉 |
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| 作者单位： | 1. 100083,北京大学第三医院骨科
2. 中南大学中国医学遗传学国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39970744) |
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| 摘 要： | 目的 观察人关节软骨细胞在体外单层培养过程中的去分化，以及转染TGF-β2在关节软骨细胞内的表达和对去分化的抑制作用。方法 从手术中切除的软骨组织中分离培养成人关节软骨细胞，通过脂质体介导的方法将已构建的pcDNA3.1( )/TGF-β2转染到体外单层培养的软骨细胞中，采用RT-PCR，ELISA、组织学染色、免疫组化和原位杂交的方法．分别对转染组和未转染组的第1、6、9代细胞进行检测，比较目的基因表达、软骨细胞形态以及胶原和多糖生物合成的差异．结果 经多次传代后，未转染软骨细胞在体外单层培养过程中逐渐走向去分化．TGF-β2、Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚糖体的表达逐渐减低．而Ⅰ型胶原的表达增高，目的基因在转染组各代软骨细胞内均得到表达，转染后细胞保持软骨细胞的形态，Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚糖体表达虽有降低．但均高于未转染的同代细胞，而Ⅰ型胶原表达增高的程度低于未转染细胞。结论 人关节软骨细胞在体外单层培养中有去分化趋势；pcDNA3.1( )/TGF-β2真核表达载体转染人关节软骨细胞获得成功．在转染后关节软骨细胞内稳定表达．并对软骨细胞的去分化有抑制作用。
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| 关 键 词： | 转染TGF-β2 关节软骨细胞 RT-PCR ELISA 组织学染色 免疫组化 原位杂交 去分化 |
| 修稿时间： | 2002-06-21 |
Inhibition of dedifferentiation of human articular chondrocytes by transfection with recombinant TGF-β2 in vitro |
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