| CD44基因变异体对人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭作用 |
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| 引用本文： | 房新建,许文林,弓晋灵,陈琛,方莉莉,陈巧云.CD44基因变异体对人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭作用[J].中华肿瘤杂志,2010,32(1). |
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| 作者姓名： | 房新建 许文林 弓晋灵 陈琛 方莉莉 陈巧云 |
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| 作者单位： | 1. 222002蚌埠医学院附属连云港市第二人民医院肿瘤内科
2. 江苏大学附属人民医院中心实验室,镇江市,212002 |
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| 基金项目： | 江苏省卫生重大课题基金 |
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| 摘 要： | 目的 探讨一种新的CD44基因变异体(CD44v17)对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响及其机制.方法 以人乳腺癌耐阿霉素细胞株(MCF-7/ADR)cDNA为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,将其T-A克隆后,进行测序;构建CD44v17质粒真核表达载体(pcDNA3.1-CD44v17);应用脂质体转染法将pcDNA3.1-CD44v17转染入MCF-7细胞中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及明胶酶谱法测定转染细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell法检测CD44v17对MCF-7细胞的侵袭力;Western blot检测胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及磷酸化蛋白激酶(p-ERK)变化.结果 限制性内切酶消化证实,重组载体已正确克隆;DNA序列分析显示,CD44v17包含CD44基因1～4号外显子、16～17号外显子、18号外显子1～205位碱基(GeneBank NO.FJ216964).MCF-7细胞转染peDNA3.1-CD44v17后,CD44 mRNA表达量和蛋白表达率分别为0.92±0.22和(70.0±2.5)%;透明质酸(HA)处理后,MMP-2 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.72±0.22和1.14.4-0.12,MMP-9 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.85±0.19和1.23±0.25,细胞侵袭能力明显增加,侵袭细胞数目为352±33个/视野,而CD44单抗可以阻断这种作用;CD44单抗和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路抑制剂预处理转染细胞后,显著阻断了P-ERK的表达.结论 在MCF-7/ADR细胞中发现CD44v17,并成功克隆和建立pcDNA3.1-CDd4v17;HA与CD44v17受体结合,通过CD44→ras→MAPK信号传导通路调节MMP-2和MMP-9的表达,从而增加MCF-7细胞的侵袭力.
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| 关 键 词： | 乳腺肿瘤 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 肿瘤侵袭 |
CD44 variant increases the invasive ability of human breast cancer cell line MCF-7 cells |
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| FANG Xin-jian,XU Wen-lin,GONG Jin-ling,CHEN Chen,FANG Li-li,CHEN Qiao-yun.CD44 variant increases the invasive ability of human breast cancer cell line MCF-7 cells[J].Chinese Journal of Oncology,2010,32(1). |
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| Authors: | FANG Xin-jian XU Wen-lin GONG Jin-ling CHEN Chen FANG Li-li CHEN Qiao-yun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CD44v17 |
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