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噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库的构建
引用本文:温宗梅,潘卫,张玉侠,周波,潘欣,陈秋莉,周霞,贾建安,蒋少华,邓松华.噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库的构建[J].安徽医科大学学报,2006,41(4):361-364.
作者姓名:温宗梅  潘卫  张玉侠  周波  潘欣  陈秋莉  周霞  贾建安  蒋少华  邓松华
作者单位:安徽医科大学病理生理学教研室,合肥,230032;第二军医大学微生物学教研室,上海,200433
基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:30472050);上海市科技攻关项目(编号:05dz19317);安徽省自然科学基金资助项目(编号:050430706)
摘    要:目的构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系。方法基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段。片段两端引入Kpn I酶切位点,3′端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S的Kpn I克隆位点上,转化大肠杆菌TGI,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示随机组合文库。结果基因合成IgA亲和体;构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,容量为3·4×107,滴度为1·6×1012TU/L;文库中含79%以上的阳性克隆;序列分析显示组合文库由ZA1、ZA2随机组合而成,连接方式符合随机连接的特点,各亲和体之间连接肽序列也呈随机分布。结论合成IgA亲和体,构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,该文库库容量、多样性和随机性可满足体外分子进化研究的要求。

关 键 词:细菌噬菌体/遗传学
文章编号:1000-1492(2006)04-0361-04
收稿时间:2006-03-24
修稿时间:2006年3月24日

Construction of phage-displayed random combinatorial library of IgA affibodies
Wen Zongmei,Pan Wei,Zhang Yuxia,et al.Construction of phage-displayed random combinatorial library of IgA affibodies[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2006,41(4):361-364.
Authors:Wen Zongmei  Pan Wei  Zhang Yuxia  
Abstract:
Keywords:bacteriophages/genetics
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