| 高纯度可溶性嵌合蛋白VEGI+的表达纯化 |
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| 引用本文： | 丁莉莉,魏锐利,蔡季平,李由.高纯度可溶性嵌合蛋白VEGI+的表达纯化[J].第二军医大学学报,2007,28(12):1324-1328. |
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| 作者姓名： | 丁莉莉 魏锐利 蔡季平 李由 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长征医院眼科,上海,200003 |
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| 基金项目： | 上海市科学技术委员会专项基金 |
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| 摘 要： | 目的:制备纯化的新型血管生长抑制剂可溶性嵌合蛋白VEGI ,为进一步研究其活性奠定基础.方法:应用PCR方法制备血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI)与寡肽CTTHWGFTLC相嵌合的融合基因VEGI ,将PCR产物克隆至pGEM-T载体中,经酶切及测序鉴定后,与原核表达载体pET30a( )重组,构建重组表达载体pET30a-VEGI ,转化大肠杆菌BL21并诱导表达,纯化并鉴定表达产物.结果:成功扩增融合基因VEGI ,构建的重组质粒pET30a-VEGI 酶切鉴定结果与预期一致,诱导后表达产物以包涵体为主.SDS-PAGE电泳及Western印迹结果表明,复性纯化后的嵌合蛋白VEGI 相对分子质量约为23 000,纯度约为90%.结论:成功构建了重组表达载体,并在大肠杆菌诱导表达,亲和层析纯化后获得纯度较高的可溶性嵌合蛋白VEGI .
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| 关 键 词： | 血管内皮生长抑制因子 寡肽类 基因融合 |
| 文章编号： | 0258-879X（2007）12-1324-05 |
| 收稿时间： | 2007-06-26 |
| 修稿时间： | 2007-10-31 |
Expression and purification of high purity soluble chimeric protein VEGI+ |
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| DING Li-li,WEI Rui-li,CAI Ji-ping,LI You.Expression and purification of high purity soluble chimeric protein VEGI+[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2007,28(12):1324-1328. |
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| Authors: | DING Li-li WEI Rui-li CAI Ji-ping LI You |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | vascular endothelial growth inhibitor oligopeptides gene fusion |
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