CGRP通过抑制过度自噬减轻缺氧/复氧心肌细胞损伤

目的 研究探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对缺氧/复氧(H/R)H9c2心肌细胞自噬的影响及其潜在的机制。方法 将六孔板中的H9c2心肌细胞随机分为4组，每组3孔：空白组、正常培养细胞、H/R组(对H9c2心肌细胞缺氧3 h复氧2 h,制备H/R模型)、H/R+CGRP(CGRP组),于H/R前20min向培养孔中加入1×10^-1 mol/L CGRP预处理。H/R组+CGRP+CGRP_8～37(CGRP_8～37组)于H/R前30 min加入1×10^-7 mol/L CGRP_8～37作用10 min,加入CGRP作用20 min。利用台盼蓝染色检测细胞存活率；检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性；利用Tunel法检测细胞凋亡；采用荧光探针JC-1检测线粒体膜电位水平；利用Western印迹法测定H9c2心肌细胞微管相关蛋白Ⅰ轻链(LC)3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin-1、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、P-mTOR的表达水平。结果 与空白...