| 人羧基肽酶H原核表达载体的构建及其应用 |
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| 引用本文： | 向斌,周智广,黄干,杨琳,张翼. 人羧基肽酶H原核表达载体的构建及其应用[J]. 中华糖尿病杂志, 2007, 15(2): 84-86 |
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| 作者姓名： | 向斌 周智广 黄干 杨琳 张翼 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所 中南大学糖尿病中心,长沙410011 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;湖南省科技厅科技计划 |
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| 摘 要： | 目的 构建人羧基肽酶H（CPH）的原核表达系统，以获得其重组蛋白，并初步应用于人CPH自身抗体（CPH—Ab）的检测。方法 采用PCR方法，从质粒pcDNAⅡ扩增出CPH基因片段，将其克隆到原核表达载体pQE30后转化宿主菌E．coli M15，IPTG诱导CPH蛋白表达，用NiNTA亲和层析柱纯化，Western—blot法检测表达蛋白的抗原性。用重组CPH蛋白作为包被抗原，初步建立检测CPH—Ab的ELISA方法。 结果 获得了CPH原核表达载体，CPH蛋白得到了表达。纯化的蛋白可被CPH—Ab阳性的1型糖尿病患者血清识别。与放射配体法相比较，以重组CPH蛋白作为包被抗原初步建立的ELISA方法，其灵敏性和特异性均升高，分别为93．3％和97．5％。结论重组CPH蛋白具有良好的抗原性，为糖尿病患者CPH—Ab的检测奠定了基础。
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| 关 键 词： | 糖尿病,自身免疫性 羧基肽酶H 重组蛋白质类 |
| 收稿时间： | 2005-09-30 |
| 修稿时间： | 2005-09-30 |
Construction of prokaryotic expression vector for human carboxypeptidase H and its application |
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| XIANG Bin , ZHOU Zhi-guang , HUANG Gan ,et al.. Construction of prokaryotic expression vector for human carboxypeptidase H and its application[J]. CHINESE JOURNAL OF DIABETES MELLITUS, 2007, 15(2): 84-86 |
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| Authors: | XIANG Bin ZHOU Zhi-guang HUANG Gan et al. |
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| Affiliation: | Institute of Metabolism and Endocrinology, Second Xiangya Hospital, Diabetes Center, Central South University, Changsha 410011 , China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Diabetes, autoimmune Carboxypeptidase H Recombinant proteins |
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