| 摘 要： | 目的探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)在苦参碱诱导结肠癌LoVo细胞凋亡及抑制增殖、迁移、侵袭中的作用。方法结肠癌LoVo细胞,分为空白对照组(不转染不加药)、转染组(转染PTEN-siRNA)、转染加药组(转染PTEN-siRNA并加入苦参碱1mg/mL)、阴性对照组(转染NC-siRNA)、阴性转染加药组(转染NC-siRNA并加入苦参碱1mg/mL)、加药组(不转染但加入苦参碱1mg/mL)。空白对照组和转染组采用MTT法检测细胞残余活性,各组采用细胞划痕实验检测细胞迁移距离,采用Transwell法检测细胞穿膜数量,采用Western blot法检测细胞PTEN、Akt、p-Akt、bax和bcl-2蛋白表达情况。结果培养48h后,转染组不同苦参碱浓度作用下细胞残余活性均高于空白对照组(P0.05),且呈浓度和时间依赖性;24、48h时空白对照组细胞迁移距离(21.60±0.14)、(11.65±0.39)mm]明显长于转染组(11.45±0.11)、(3.40±0.28)mm]和转染加药组(13.15±0.25)、(6.01±0.28)mm],短于阴性转染加药组(23.10±0.81)、(14.85±0.32)mm]和加药组(23.65±0.03)、(15.40±0.27)mm](P0.05);与空白对照组比较,转染组和转染加药组细胞穿膜数量均增加,阴性转染加药组和加药组细胞穿膜数量均减少;转染组PTEN(0.37±0.04)、bax(0.84±0.11)蛋白表达量明显低于空白对照组(0.57±0.06、1.03±0.02)、加药组(1.21±0.04、1.51±0.03)和阴性转染加药组(1.31±0.02、1.49±0.19)(P0.05),Bcl-2蛋白表达量(1.19±0.04)明显高于空白对照组(0.67±0.11)、加药组(0.44±0.03)和阴性转染加药组(0.48±0.03)(P0.05);空白对照组PTEN、Akt(0.98±0.02)及bax蛋白表达量低于加药组(Akt为1.22±0.14)和阴性转染加药组(Akt为1.12±0.07),高于转染组(Akt为0.97±0.05)和转染加药组(Akt为0.96±0.07)(P0.05)。结论苦参碱可上调PTEN基因表达,明显抑制LoVo细胞增殖、迁移、侵袭及诱导细胞凋亡与PI3K-Akt信号通路有关。
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