半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中过量表达及IPTG诱导条件 |
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引用本文: | 陈卫,葛佳佳,张灏,丁霄霖.半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中过量表达及IPTG诱导条件[J].中国脊柱脊髓杂志,2002(5). |
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作者姓名: | 陈卫 葛佳佳 张灏 丁霄霖 |
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作者单位: | 江南大学食品学院 江苏无锡214036
(陈卫,葛佳佳,张灏),江南大学食品学院 江苏无锡214036(丁霄霖) |
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摘 要: | 从嗜热脂肪芽孢杆菌 (IAM 110 0 1)中克隆出编码热稳定的半乳糖苷酶蛋白基因bgaB ,构建具T7强启动子的pET 2 0 (b) bgaB质粒 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)中进行表达 .经IPTG诱导后 ,重组菌周质中乳糖酶酶活达到 0 .12U /mL ,胞内酶活为 1.35U /mL ,比酶活为 6 .6 6U/mg蛋白 ,比酶源菌产生的酶活提高 5 0倍 .通过对IPTG诱导时机、诱导浓度和诱导时间的优化研究 ,重组菌产生的比酶活进一步提高至酶源菌的 90倍 .
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关 键 词: | 嗜热脂肪芽孢杆菌 β-半乳糖苷酶 基因克隆 T7表达系统 大肠杆菌 诱导条件 |
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