c-Kit+Lin-细胞体外扩增及体内分化的实验研究

目的　研究移植刚分选及扩增后雄性小鼠的骨髓c-Kit+Lin-细胞到酒精性肝纤维化雌性模型小鼠体内后，模型小鼠的肝脏形态改变、肝功能变化和移植细胞的分布、分化及归巢情况。　方法　　采用酒精灌胃法建立酒精性肝纤维化雌性小鼠模型，造模成功后随机选取8只模型小鼠（模型组）与正常小鼠8只（对照组）比较两组肝功能变化。剩余模型小鼠再随机选取32只，分为4组处理，并再随机选取8只正常小鼠（第1组）与其对照。模型小鼠的4组分别为：移植前取血处死组（第2组），移植新鲜分选的c-Kit+ Lin-细胞组（第3组），移植扩增后的c-Kit+ Lin-细胞组（第4组），仅予以注射Buffer组（第5组）。采用免疫磁珠法分选雄性小鼠骨髓c-Kit+Lin-细胞；利用SCF+ HGF+ FL+LIF +TPO+ IL-3因子组合对其进行体外扩增；将刚分选及扩增后c-Kit+Lin-细胞移植入酒精性肝纤维化雌性模型小鼠体内，检测两组肝功能改变、肝脏纤维化改善、含雄性小鼠Y染色体性别决定基因cDNA(Sry)的移植细胞在受体肝内定居分化情况。　结果　　（1） 两移植组在移植30天后，较移植前肝脏纤维化改善明显；（2） 两移植组在移植30天后AST、ALT、ALB与移植前比较差异有显著性意义（P<0.05）；（3）两移植组均可见含雄性小鼠Y染色体性别决定基因cDNA(Sry)的移植细胞，并同时表达ALB mRNA，计数细胞比例，比较差异无显著性意义（P>0.05）。　结论　　移植c-Kit+ Lin-细胞后能在受体肝内定居并转化成有功能新生肝细胞；移植c-Kit+ Lin-细胞后能明显改善肝损伤小鼠的肝功能及肝脏纤维化；扩增对c-Kit+Lin-细胞的归巢、在体内分化没有明显影响。