| 肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的研制与鉴定 |
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| 引用本文： | 汪力亚,郑仁瑞,徐志凯,汪美先,姜绍谆.肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的研制与鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,1987(2). |
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| 作者姓名： | 汪力亚 郑仁瑞 徐志凯 汪美先 姜绍谆 |
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| 作者单位： | 第四军医大学微生物学教研室 西安
(汪力亚，郑仁瑞，徐志凯，汪美先)，第四军医大学微生物学教研室 西安(姜绍谆) |
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| 基金项目： | 总后卫生部，陕西省卫生厅的资助 |
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| 摘 要： | 本文报道,从肾综合征出血热病毒(HFRSV)感染乳鼠鼠脑中提取高滴度的血凝素(HAN),以该血凝素免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合。融合率为60％和78％,阳性孔率为15％和44％。IFA筛选后共获得56株分泌抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系。对其中1A_3,2A_(11),1B_3,3D_8,2F_7,1G_4,1G_9,3G_1,3G_(11),2H_1十株细胞系用有限稀释法进行了3～4次克隆化,阳性克隆率达到100％。杂交瘤细胞系经连续传代培养巳6个多月,仍能稳定地分泌单克隆抗体。冻存的细胞系经复苏后仍能稳定地分泌McAb。应用血凝抑制(Hl)试验证明其中9株为特异性分泌抗HFRSVHHAN McAb 的杂交瘤细胞系,1株(2A_(11))是抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系,其中(1:81920)和3G_1(1:40960)具有高滴度的血凝抑制活性。应用微量细胞培养中和试验(NT)证明其中6抗1A_8,1B_3,3D_8,1G_4,3G_1,3G_(11))具有中和活性.尤其3D_8(1:5120)和3G_1(>1:10240)有较高的中和效价。IFA测定了10株杂交瘤细胞的McAb与HFRSV陈株抗原片反应的抗体效价,其中培养上清为1:40～1:320,杂交瘤腹水为1:1万～1:8万。10种单克隆抗体与JEV、HSV-I和正常Vero-E_6细胞抗原片均无交叉反应。但均能与不同疫区、不同宿主分离的HFRSV陈株81-14A,A9和R_(22)抗原片反应,说明HFRSV血凝素McAb具
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| 关 键 词： | 肾综合征出血热病毒(HFRSV) 血凝素(HAN) 单克隆抗体(McAb)血凝抑制(HI)活性 |
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