流式细胞术外周血样本预处理最佳试验条件探索 |
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引用本文: | 郭屹锦,景玮亮,滕晋莹,邸志权,关云轩,徐旭.流式细胞术外周血样本预处理最佳试验条件探索[J].山西医科大学学报,2023(7):1006-1012. |
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作者姓名: | 郭屹锦 景玮亮 滕晋莹 邸志权 关云轩 徐旭 |
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作者单位: | 1. 天津中医药大学中药学院药理教研室;3. 中国医学科学院药物代谢新技术创新单元 |
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摘 要: | 目的 探索流式细胞术基于外周血样本预处理抗体量、样本放置时间、样本固定与否的最佳试验条件。方法 采集3只正常大鼠EDTA抗凝全血进行白细胞及淋巴细胞计数,随机定义为样本A,B,C,各样本分为4份,分别用于检测各淋巴细胞亚群CD3+,CD3-CD45RA+,CD3+CD4+,CD3+CD8+的含量,每份样本抗体上样量都以标示量1μg的1/4,1/2,1,2倍孵育并标记。根据试验结果,1/4倍抗体完全满足检测所需,又采集3只正常大鼠血液样本,随机定义为样本D,E,F,处理同样本A,B,C,每份样本抗体上样量都以标示量1μg的1/4,1/8倍孵育并标记。将1/4抗体标示量处理好的样本D,E,F,即刻上机检测(固定前),之后将样本分成两部分:一部分分别于固定后15 min, 24 h上机检测;另一部分2~8℃避光保存,分别保存0.5,1.5,3 h后上机检测。结果 (1)各样本淋巴细胞数处于47万~100万。样本A,B,C抗体使用量降至0.2...
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关 键 词: | 流式细胞术 淋巴细胞亚群 抗体量 保存时间 多聚甲醛固定 |
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