| 改良全骨髓贴壁法分离及培养大鼠骨髓间充质干细胞 |
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| 引用本文： | 鲁燕妮,龙雯,常晓峰,赵宁波.改良全骨髓贴壁法分离及培养大鼠骨髓间充质干细胞[J].山西医科大学学报,2023(3):364-369. |
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| 作者姓名： | 鲁燕妮 龙雯 常晓峰 赵宁波 |
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| 作者单位： | 1. 西安交通大学口腔医院陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室;2. 西安交通大学口腔医院陕西省牙颌疾病临床研究中心;3. 西安交通大学口腔医院种植科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年基金资助项目(82001085)； |
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| 摘 要： | 目的 建立简单、优化的分离及培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的方法，为组织工程支架研究提供细胞基础。方法 分别采用常规和改良的全骨髓贴壁法分离和培养BMSCs。常规法按照传统全骨髓贴壁法，对骨髓冲洗液进行过筛和离心处理后加入完全培养基进行培养。在改良全骨髓贴壁法中，将骨髓冲出骨髓腔后直接加入完全培养基进行培养。倒置相差显微镜下观察两组细胞形态，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法比较两组BMSCs的增殖活性，流式细胞术检测表面标志物CD90、CD29、CD11b/c、CD45。对改良法培养的BMSCs进行定向诱导成骨及成脂分化，并通过茜素红染色检测其成骨分化潜能，通过油红O染色检测其成脂分化潜能。结果 改良全骨髓贴壁法培养的BMSCs形态均一，细胞集簇排列呈“鱼群状”“漩涡状”。改良法比常规法培养的BMSCs增殖活性强(P<0.05)。改良法与常规法培养的BMSCs均高表达CD90和CD29,低表达CD11b/c和CD45。改良法培养的BMSCs成骨、成脂诱导分化后茜素红染色和油红O染色均为阳性。结论 改良全骨髓贴壁法可成功分离并培养BMSCs,培养的BMSCs具有多向分化潜...
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| 关 键 词： | 改良全骨髓贴壁法 骨髓间充质干细胞 原代培养 细胞分化 |
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