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| 小鼠巨噬细胞活化标志物IL-12/IL-10启动子荧光素酶报告基因模型的构建及鉴定 | |
| 作者单位： | ;1.武汉大学人民医院药学部;2.武汉大学人民医院肿瘤中心 |
| 摘 要： | 目的:构建pGL3-IL-12p40promoter和pGL3-IL-10promoter两个荧光素酶报告基因载体,并对其进行生物活性鉴定。方法:通过提取小鼠T细胞基因组DNA,分别PCR扩增IL-12p40和IL-10基因的启动子序列,与pGL3-Basic连接成重组体pGL3-IL-12p40promoter和pGL3-IL-10promoter,通过转化扩增,筛选出阳性克隆,并通过酶切、测序及生物学活性检测鉴定构建好的荧光素酶报告基因载体。结果:成功构建了pGL3-IL-12p40promoter和pGL3-IL-10promoter两个荧光素酶报告基因载体,分别在IFN-γ或IL-4的诱导下,能启动细胞内荧光素酶的表达。结论:pGL3-IL-12p40promoter和pGL3-IL-10promoter的荧光素酶报告基因载体的成功构建为研究IL-12和IL-10蛋白的表达调控机制和以IL-12/IL-10为检测指标的巨噬细胞活化状态的判断,以其为靶标的抗肿瘤药物的快速高通量筛选提供了重要的研究工具。 |
| 关 键 词： | IL-12 IL-10 启动子序列 荧光素酶报告基因 巨噬细胞活化 |
Construction and Identification of Luciferase Reporter Gene Containing Murine IL-12 Promoter and IL-10 Promoter |
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