摘 要: | 目的 基于中医风寒湿致痹理论,探索软骨细胞温感蛋白TRPM8/TRPV1/TRPA1在风寒湿血清干预后的的表达情况。方法 采用改良Hulth法结合人工气候箱制备风寒湿血清用以后续干预,取新生SD大鼠软骨细胞结合白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)构建软骨细胞炎症;细胞分组:Control组、KOA组(IL-1β 20ng/ml)、NC组(IL-1β 20ng/ml+正常大鼠血清10%)、FHS组(IL-1β 20ng/ml+风寒湿大鼠血清10%);CCK8法检测风寒湿血清干预后软骨细胞的增殖活性,甲苯胺蓝及阿利新蓝染色鉴定软骨细胞形态,RT-qPCR与Western blot检测软骨细胞炎性因子及TRPA1、TRPM8、TRPV1基因蛋白的表达。结果 风寒湿血清浓度≥20%能显著抑制软骨细胞的增长,10%的血清浓度干预24h、48h对软骨细胞活力无明显影响;Western blot显示,风寒湿血清干预组TRPM8、TRPV1、TRPA1、TNFα、IL-1β、TNFα蛋白表达量明显升高(P<0.05);RT-qPCR显示,风寒湿血清干预组IL-1β、TNFα...
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