| 人TIMP-2重组腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 赵新,张培瑞,余祥海,廖明芳,景在平.人TIMP-2重组腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达[J].中国现代普通外科进展,2005,8(5):288-291. |
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| 作者姓名： | 赵新 张培瑞 余祥海 廖明芳 景在平 |
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| 作者单位： | 1. 解放军302医院,肝胆外科,北京,100039
2. 第二军医大学附属长海医院,血管外科,全军血管外科研究所,上海,200433 |
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| 摘 要： | 目的:构建含人TI MP-2(hTI MP-2)基因的重组腺病毒载体并在大鼠主动脉平滑肌细胞中表达,为血管疾病基因治疗提供实验基础。方法:利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1以及线性化的重组穿梭质粒pTrack-CMV-hTI MP-2共转化BJ5183受体菌,并在其中发生同源重组,利用重组前后抗性的改变筛选出重组子;重组腺病毒质粒AdhTI MP-2经过293细胞的包装,扩增和纯化后,测定病毒滴度。腺病毒体外感染大鼠主动脉平滑肌细胞,一步法提取细胞总RNA,RT-PCR检测hTI MP-2的mRNA。并收集细胞上清,进行Western blot检测TI MP-2蛋白。结果:得到了携带hTI MP-2基因的重组腺病毒,纯化后滴度为4×1011efu/ml,在感染VSMC后24h即检测到hTI MP-2的表达。结论:成功地构建了携带hTI MP-2的重组腺病毒载体并体外转染VSMC,为下一步应用于血管疾病基因治疗提供了基础。
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| 关 键 词： | 基质金属蛋白酶抑制剂·腺病毒 人·肌 平滑 血管 |
| 文章编号： | 1009-9905（2005）05-0288-04 |
| 修稿时间： | 2005年3月31日 |
The expression of human tissue inhibitor of metalloproteinase-2(TIMP-2)gene in rat aortic smooth muscle cells mediated by adenoviral vector |
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| ZHAO Xin,ZHANG Pei-rui,YU Xiang-hai,LIAO Ming-fang,JING Zai-ping.The expression of human tissue inhibitor of metalloproteinase-2(TIMP-2)gene in rat aortic smooth muscle cells mediated by adenoviral vector[J].Chinese Journal of Current Advances in General Surgery,2005,8(5):288-291. |
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| Authors: | ZHAO Xin ZHANG Pei-rui YU Xiang-hai LIAO Ming-fang JING Zai-ping |
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| Institution: | ZHAO Xin1,ZHANG Pei-rui1,YU Xiang-hai1,LIAO Ming-fang2,JI NG Zai-ping2 1Department of Hepatobiliary Surgery,302 Hospital of PLA |
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