| p16-INK4alpha重表达对人食管癌细胞系EC109生长的抑制作用 |
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| 引用本文： | 周勇安, 谷仲平, 王线妮, 马群风, 黄立军.p16-INK4alpha重表达对人食管癌细胞系EC109生长的抑制作用[J].世界华人消化杂志,2001,9(8):877-881. |
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| 作者姓名： | 周勇安 谷仲平 王线妮 马群风 黄立军 |
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| 作者单位： | 710038, 陕西省西安市新寺路, 中国人民解放军第四军医大学唐都医院胸外科.
zhouya@fmmu.edu.cn |
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| 摘 要： | 目的探讨用腺病毒介导野生型的p16基因在食管癌细胞系表达,研究重表达野生型p16基因对食管癌细胞系EC109生长的抑制作用,为寻找食管癌致癌机制的研究及其基因治疗提供理论基础.方法用基因重组技术,将pcDNA3-p16中的野生型p16基因用Kpn I/BamH I进行双酶切,克隆入腺病毒表达载体pAdCMV中,将重组质粒pad-CMV-p16与腺病毒质粒JM17用Lipofectamime 2000共转染293细胞,产生重组腺病毒.用重组腺病毒感染人食管癌细胞系EC109,在感染后的不同时段,用免疫荧光、打点杂交方法检测p16基因在细胞中的表达用MTT法及流式细胞仪观察p16基因的表达对食管癌细胞株生长的影响.结果经酶切鉴定野生型p16基因克隆入腺病毒表达载体中,与JM17共转染293细胞后,可产生具有感染活性的重组腺病毒,用重组腺病毒感染食管癌细胞株EC109细胞后,可抑制食管癌细胞的生长,同对照组相比其最大抑制率可达52.7%.Multipcycle分析软件分析对细胞周期影响表明,处于G0～G1期的细胞为41%～63%感染后的细胞经Dot blot和Westernblot杂交证实,有外源的p16mRNA及蛋白的表达.结论重组腺病毒可将野生型p16基因导入人食管癌细胞系EC109中,野生型p16基因在p16基因功能缺失的细胞中重表达能抑制癌细胞恶性生长.p16基因功能缺失是食管癌致癌因素之一
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| 关 键 词： | 食管肿瘤/病理学 肿瘤细胞 培养的 基因 p16 基因表达 腺病毒科/遗传学 流式细胞术 |
| 修稿时间： | 2001年5月31日 |
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