| 双耐药基因导入脐血干／祖细胞降低联合化疗骨髓毒性作用的临床前研究 |
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| 引用本文： | 王季石!,夏学鸣!,陈子兴!,卢大儒,薛京伦,阮长耿!.双耐药基因导入脐血干／祖细胞降低联合化疗骨髓毒性作用的临床前研究[J].中华血液学杂志,2001,22(4):197-201. |
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| 作者姓名： | 王季石! 夏学鸣! 陈子兴! 卢大儒 薛京伦 阮长耿! |
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| 作者单位： | 苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所(王季石!215006，夏学鸣!215006，陈子兴!215006，阮长耿!215006)，复旦大学遗传学研究所(卢大儒，薛京伦) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金!( 3 9770 3 3 1)，贵州省科委基金!(E97 5 )资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨转染醛脱氢酶基因 (ALDH3)和多药耐药基因 (mdr 1)的人脐血CD3 4 细胞能否同时增强对活性环磷酰胺 (4 HC)和mdr 1基因靶药的抗性。方法 构建含ALDH3和mdr 1双耐药基因的逆转录病毒表达质粒G1Na ALDH3 IRES MDR1,经LipofectAMINE介导转染包装细胞 ,采用含 4 HC和长春新碱 (VCR)的培养基克隆选择后收集重组病毒上清于单向型GP E86与双嗜型PA317包装细胞行乒乓交互感染 ,将含ALDH3和mdr 1双耐药基因重组病毒的上清在细胞生长因子刺激下重复感染经免疫磁珠分离系统 (MACS)纯化后的人脐血CD3 4 细胞 ,用PCR、RT PCR、Southernblot、Northernblot、FACS和MTT等方法检测外源ALDH3与mdr 1基因在CD3 4 细胞中的转移和表达。结果 MACS分离纯化后的人脐血CD3 4 细胞纯度平均达 91% ,回收率为 72 % ,含双耐药基因重组病毒的上清最高滴度为 6 .5× 10 5CFU/ml,应用集落计数、PCR和FACS方法测定基因转导效率分别为 18.0 %、2 0 .0 %和16 7% ,未检测到辅助病毒存在 ,有P170功能的细胞占 16 0 % ,经双耐药基因修饰的脐血CD3 4 细胞对 4 HC的IC50 较对照组提高 3.5倍 ,对VCR和柔红霉素的IC50 较未转染细胞分别高 6 .8和 5 .5倍。结论 逆转录病毒载体介导双耐药基因转导脐血造血干 /祖细胞获高效共表
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| 关 键 词： | 多药耐药 载体 造血干细胞 基因疗法 胎血 双耐药基因导入 联合化疗 骨髓毒性 |
Improvement of combination chemotherapy tolerance of human umbilical cord blood CD_(34)~ cells transducted with double drug resistance genes by a bicistronic retroviral vector |
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| WANG Jishi,XIA Xueming,CHEN Zixing,et al..Improvement of combination chemotherapy tolerance of human umbilical cord blood CD_(34)~ cells transducted with double drug resistance genes by a bicistronic retroviral vector[J].Chinese Journal of Hematology,2001,22(4):197-201. |
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| Authors: | WANG Jishi XIA Xueming CHEN Zixing |
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| Institution: | WANG Jishi,XIA Xueming,CHEN Zixing,et al. Jiangsu Institute of Hematology,First Affiliated Hospital of Suzhou Medical College,Suzhou 215006,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene Resistance multiple Vector Hematopoietic stem cells Gene therapy Umbilical cord blood |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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