| 脂质体介导NF-кB decoy ODN低温缺氧对ECV-304的转染及复氧后对下游粘附分子及趋化因子基因表达的影响 |
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| 引用本文： | 丰贵文,于立新,张宏涛,赵显国. 脂质体介导NF-кB decoy ODN低温缺氧对ECV-304的转染及复氧后对下游粘附分子及趋化因子基因表达的影响[J]. 中国现代医学杂志, 2004, 14(11): 84-87 |
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| 作者姓名： | 丰贵文 于立新 张宏涛 赵显国 |
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| 作者单位： | 1. 第一军医大学南方医院,肾移植科,广东,广州,510515
2. 郑州大学第一附属医院,器官移植血液净化中心,河南,郑州,450052 |
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| 摘 要： | 目的探讨在Euro-Collin's(ECs)中,低温(4℃)缺氧条件下脂质体(in v1vo Liposome)介导N F-κ B诱捕物寡核苷酸(NF-κ B decoy ODN)对人脐静脉内皮细胞株(ECV-304)的转染效率以及复氧后对其细胞分子表达的影响.方法ECV-304在10?S的RPMI 1640培养液,37℃、5%CO2条件下培养,生长至单层融合后进行试验.使用前配制Liposome/decoy ODN和scrambled ODN复合物,Liposome与ODN的 /-电荷比率为2.应用荧光显微镜和流式细胞仪,观察在4℃条件下,ODN浓度1.0μM的ECs缺氧保存6h后ECV-304的平均荧光强度(MFI)和摄取率以及ODN的胞内分布;同时设立裸ODN转染为对照,观察Liposome介导ODN对ECV-304的转染效率.利用RT-PCR方法检测各组ECV-304的ICAM-1、VCAM-1、IL-8、MCP-1以及P-selectin的mRNA表达.结果在ECs中、4℃缺氧保存ECV-304 6h后,LiPosome介导ODN对ECV-304转染的MFI为10172.71±33.14,是裸ODN转染的91.1倍,细胞对ODN的摄取率为93.06±2.60%,是裸ODN转染的71 5倍.Liposome介导ODN转染的ECV-304,荧光显微镜下可见部分荧光颗粒分布于胞浆,胞核内可见强荧光颗粒;而裸ODN转染的ECV-304,胞浆内偶见少量荧光,胞核内未见荧光颗粒RT-PCR检测显示Liposome/decoy ODN转染ECV-304后,其ICAM-1,VCAM-1,IL-8,MCP-1以及P-selectin的mRNA的表达低于未转染组和Scramb.ODN转染组,有显著性差异.结论低温缺氧条件下和ECs中,Liposome能有效地将ODN转染到ECV-304的胞核中,而裸ODN则不能进入细胞;经Liposome/decoy ODN处理的ECV-3 04,其下游粘附分子及趋化因子的基因表达被抑制.
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| 关 键 词： | 低温缺氧保存/复氧 转染 基因表达 |
| 文章编号： | 1005-8982(2004)11-0084-04 |
| 修稿时间： | 2004-03-27 |
Transfection of NF-κB decoy ODN mediated by Liposome on ECV-304 under hypothermic/anoxic condition and influence on genic expression of some adhesive and chemoattractant molecules after reoxygenation |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ECV-304 Liposone/decoy ODN |
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