| 采用PCR技术从高GC含量绿脓杆菌模板中扩增长片段外毒素A全基因 |
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| 引用本文： | 胡晓梅,饶贤才,黄建军,金晓琳,朱军民,胡福泉. 采用PCR技术从高GC含量绿脓杆菌模板中扩增长片段外毒素A全基因[J]. 第三军医大学学报, 2003, 25(9): 833-834 |
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| 作者姓名： | 胡晓梅 饶贤才 黄建军 金晓琳 朱军民 胡福泉 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程重点实验室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 全军“十五”医学科研青年基金资助项目 ( 0 1Q10 8) |
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| 摘 要： | 从高GC含量的模板中用PCR方法扩增长片段DNA序列是相当困难的。本室通过对PCR反应体系和条件的优化 ,成功地从绿脓杆菌高GC含量的染色体模板中扩增到了 1966bp的外毒素A(PseudomoneasaeruginosaexotoxinA ,PEA)全长结构基因 ,为实现PEA的高效表达奠定了基础。1 材料与方法1 1 绿脓杆菌PA10 3菌株染色体DNA和PCR引物的制备 按常规方法提取绿脓杆菌PA10 3染色体DNA。参照Gray等公布的序列设计一对分别位于PEA结构基因两侧的引物。5′引物 :5′ GATCAGCCTCATCCTTCAC 3′(Tm =66) ;3′引物 :5′ GGTCGCGGCAGT…
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| 关 键 词： | PCR技术 高GC含量 绿脓杆菌模板 DNA 外毒素A PCR扩增 长片段基因 |
| 文章编号： | 1000-5404(2003)09-0833-02 |
| 修稿时间： | 2002-03-14 |
PCR amplification of long exotoxin A gene from GC-rich Pseudomonas aeruginosa genomic DNA |
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