| 自分泌运动因子受体基因及其干扰RNA表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 孙琰,周文霞,张永祥. 自分泌运动因子受体基因及其干扰RNA表达载体的构建[J]. 基础医学与临床, 2010, 30(8): 868-872 |
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| 作者姓名： | 孙琰 周文霞 张永祥 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973),国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863) |
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| 摘 要： | 目的 构建AMFR基因的表达载体和AMFRsiRNA表达载体,观察AMFRsiRNA对AMFR基因表达的影响。方法 采用PCR技术,扩增AMFR基因,并将其插入到带FLAG标签的真核表达载体上;利用RNAi技术,设计并合成了两条针对AMFR基因的siRNA,将其克隆到pSliencer 2.1-U6 neo表达载体上。将构建的AMFR基因表达载体和AMFRsiRNA表达载体共转染人胚肾细胞293T,通过Western blot实验了解AMFRsiRNA对AMFR基因表达的影响。结果 通过双酶切和测序鉴定表明,构建的AMFR基因表达载体和AMFRsiRNA表达载体序列正确;通过Western blot实验证明,构建的AMFRsiRNA能有效抑制AMFR基因的表达。结论 成功构建了AMFR基因表达载体和AMFRsiRNA表达载体,且表达的AMFRsiRNA能有效地抑制AMFR基因的表达。
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| 关 键 词： | AMFR 表达载体 RNAi 转染 |
| 收稿时间： | 2009-10-09 |
| 修稿时间： | 2009-12-09 |
Construction of expression vector of autocrine motility factor receptor and its interference RNA |
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| SUN Yan,ZHOU Wen-xia,ZHANG Yong-xiang. Construction of expression vector of autocrine motility factor receptor and its interference RNA[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2010, 30(8): 868-872 |
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| Authors: | SUN Yan ZHOU Wen-xia ZHANG Yong-xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | AMFR RNAi |
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