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| PCR指纹图技术筛选鼠疫耶尔森菌种特异性探针的研究 | |
| 引用本文： | 宋亚军,王津,徐涛,宫占威,郭兆彪,张敏丽,杨瑞馥.PCR指纹图技术筛选鼠疫耶尔森菌种特异性探针的研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2002,22(4):365-368. |
| 作者姓名： | 宋亚军 王津 徐涛 宫占威 郭兆彪 张敏丽 杨瑞馥 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院微生物流行病研究所,国家生物医学分析中心分析微生物学实验室 2. 军事医学科学院基础医学研究所 3. 兰州军区联勤部医学研究所 |
| 摘 要： | 目的 利用PCR指纹图技术筛选细菌种特异性探针，探索利用PCR指纹图技术实现病原菌通用检测的可能性。方法 以鼠疫耶尔森菌为实验对象，利用REP－1和REP－2引物对在非严谨的条件下进行PCR指纹图扩增；将所有扩增片段纯化后，克隆至pGEM-T载体，转化大肠杆菌JM109；用生物素化的载体引物扩增克隆化片段，进行末端标记；在硝酸纤维素膜上固定鼠疫杆菌的染色体DNA以及相应对照菌株的染色体DNA，以末端标记的扩增产物进行杂交，通过生物素－链霉亲和素－辣根过氧化物酶系统显色，判断扩增片段的特异性。结果 经杂交筛选，发现1个长度约为900bp的扩增具有较好的杂交特异性片段，将序列与鼠疫耶尔森菌已完成的基因组序列比较，仅发现4个核苷酸的差异；根据这段序列设计的引物对可以特异性地扩增鼠疫耶尔森菌的模板。结论 利用PCR指纹图技术成功筛选到一段鼠疫耶尔森菌的种特异性探针，为细菌通用检测技术的研究开辟了新的思路。 |
| 关 键 词： | 种特异性探针 鼠疫 耶尔森菌 PCR指纹图 微生物检测 |
| 修稿时间： | 2001年7月7日 |
Screening for Yersinia pestis species-specific probes by PCR fingerprinting |
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| SONG Yajun ,WANG Jin,XU Tao,GONG Zhanwei,GUO Zhaobiao,ZHANG Minli,YANG Ruifu. Laboratory of Analytical Microbiology,National Center for Biomedical Analysis.Screening for Yersinia pestis species-specific probes by PCR fingerprinting[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2002,22(4):365-368. | |
| Authors: | SONG Yajun WANG Jin XU Tao GONG Zhanwei GUO Zhaobiao ZHANG Minli YANG Ruifu Laboratory of Analytical Microbiology National Center for Biomedical Analysis |
| Institution: | SONG Yajun *,WANG Jin,XU Tao,GONG Zhanwei,GUO Zhaobiao,ZHANG Minli,YANG Ruifu. *Laboratory of Analytical Microbiology,National Center for Biomedical Analysis,Institute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Military Science,Beijing 10007 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Yersinia pestis PCR fingerprinting Hybridization Probes |
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