| 新生大鼠心肌细胞分离、纯化及培养方法的改进 |
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| 引用本文： | 庞勇军,孙莉,谢文娟,莫书荣. 新生大鼠心肌细胞分离、纯化及培养方法的改进[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2011, 0(4): 520-523 |
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| 作者姓名： | 庞勇军 孙莉 谢文娟 莫书荣 |
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| 作者单位： | 桂林医学院生理学教研室;广西医科大学生理学教研室;桂林医学院组织学与胚胎学教研室;桂林医学院生药学教研室; |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金(0728140)~~ |
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| 摘 要： | 目的应用酶消化法消化心室肌组织,培养心肌细胞,探索获得高存活率和高纯度心肌细胞的培养条件,为生理学和药理学研究提供细胞模型。方法胰蛋白酶和胶原酶Ⅰ联合消化新生大鼠心室肌组织,控制消化时间和消化温度;用差速贴壁法和化学抑制法纯化心肌细胞进行体外培养。荧光显微镜观察心肌细胞形态学变化;流式细胞仪检测肌钙蛋白Ⅰ的表达;Fluo-3/AM进行细胞质内游离钙离子染色。结果培养的心肌细胞4 h后开始贴壁生长,24 h后有少数单个细胞出现自发性节律性搏动,之后连接成片,细胞簇同步收缩,细胞形态、结构完整;肌钙蛋白Ⅰ阳性率为91%;所有心肌细胞细胞质内钙离子染色阳性,荧光强度随细胞搏动呈强弱周期性变化。结论应用酶消化法可简单快捷地获得大量活力好、纯度高的心肌细胞,为心血管相关研究提供良好的实验模型。
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| 关 键 词： | 心肌细胞 分离 原代培养 胶原酶 大鼠 |
Improvement of method for separating and culturing neonatal rat ventricular myocytes |
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| PANG Yong-jun,,SUN Li,XIE Wen-juan,MO Shu-rong. Improvement of method for separating and culturing neonatal rat ventricular myocytes[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2011, 0(4): 520-523 |
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| Authors: | PANG Yong-jun SUN Li XIE Wen-juan MO Shu-rong |
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| Affiliation: | PANG Yong-jun1,2,SUN Li3,XIE Wen-juan4,MO Shu-rong2(1.Department of Physiology,Guilin Medical University,Guilin541004,China,2.Department of Physiology,Guangxi Medical University,Nanning530021,3.Department of Histology and Embryology,4.Department of Pharmacognosy,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cardiomyocyte isolation primary culture collagenase rat |
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