串联siRNA对SW480细胞中增殖诱导配体基因表达的影响

目的分析串联siRNA在SW480细胞中对增殖诱导配体(APRIL)基因的作用效果,探讨串联siRNA对APRIL基因表达的应用价值。方法设计筛选4条针对于APRIL基因的shRNA片段(即sh644、sh1938、sh1451、sh2231),分别将其与pGenesil-1.1质粒表达载体连接,形成4个单一表达载体(pGsh644、pGsh1938、pGsh1451、pGsh2231),同时将4条shRNA与pGenesil4-T质粒连接,共同构成pG4串联siRNA表达载体。应用阳离子脂质体法对结直肠癌细胞株SW480进行转染。采用实时荧光定量PCR以及Western blot法对SW480细胞的APRIL mRNA和蛋白表达进行检测。结果酶切及测序证实串联siRNA质粒载体构建成功。siRNA能够抑制SW480细胞APRIL基因表达,pG4组APRIL mRNA抑制率为77.72%,蛋白质表达抑制率为84.74%,显著高于其他质粒,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论串联siRNA表达载体能够抑制结直肠癌SW480细胞株的APRIL基因表达,为结直肠癌APRIL基因治疗提供基础。