| 人神经营养因子-3基因的亚克隆及其基因工程细胞模型的建立 |
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| 引用本文： | 常红,郭梦和,郭坤元,李永贺. 人神经营养因子-3基因的亚克隆及其基因工程细胞模型的建立[J]. 南方医科大学学报, 2004, 24(7): 805-808 |
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| 作者姓名： | 常红 郭梦和 郭坤元 李永贺 |
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| 作者单位： | 1. 第一军医大学珠江医院耳鼻咽喉科, 广东, 广州, 510282;2. 第一军医大学珠江医院血液科, 广东, 广州, 510282 |
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| 基金项目： | 珠江医院科研创新院长基金(200401)~~ |
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| 摘 要： | 目的 亚克隆人神经营养因子-3(human neurotrophin-3,NT3)并转染至体外培养的人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs),建立能够表达和分泌NT3的基因工程细胞模型。方法 采用低糖DMEM培养液+10%胎牛血清体外培养BM-MSCs,流式细胞仪分析其表面标记;构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/NT3并通过脂质体介导转染BM-MSCs;收集部分细胞提取其中的总RNA,经逆转录PCR检测NT3基因表达;利用培养上清液体外孵育毛细胞以鉴定其生物学活性。结果 BM-MSCs表达CD13、CD29、CD59,不表达CD11、CD14、CD31、CD34、CD45、CD80、CD86、CD117、HLA-DR;pcDNA3.1(+)/NT3转染BM-MSCs后,能够表达和分泌NT3,并具有生物学活性,可促进离体的豚鼠耳蜗毛细胞存活。结论 在体外建立表达NT3基因并分泌NT3的基因工程细胞是可行的。
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| 关 键 词： | 神经营养因子-3/分泌 骨髓间充质干细胞/遗传学 转染 |
| 文章编号： | 1000-2588(2004)07-0805-04 |
| 修稿时间： | 2004-01-07 |
Subcloning of human neurotrophin-3 gene and construction of its genetically engineered cell model |
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| CHANG Hong,GUO Meng-he,GUO Kun-yuan,LI Yong-he. Subcloning of human neurotrophin-3 gene and construction of its genetically engineered cell model[J]. Journal of Southern Medical University, 2004, 24(7): 805-808 |
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| Authors: | CHANG Hong GUO Meng-he GUO Kun-yuan LI Yong-he |
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| Affiliation: | CHANG Hong~1,GUO Meng-he~1,GUO Kun-yuan~2,LI Yong-he~1 ~1Department of Otolaryngology,~2Department of Hematology,Zhujiang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510282,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | neurotrophin-3/secretion bone marrow mesenchymal stem cell/genetics transfection |
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