| 结核分枝杆菌ESAT-6基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 金磊,吴洁敏,倪培华.结核分枝杆菌ESAT-6基因的克隆与表达[J].上海医学检验杂志,2004(4). |
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| 作者姓名： | 金磊 吴洁敏 倪培华 |
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| 作者单位： | 上海中医药大学附属曙光医院检验科 上海200021
(金磊)，上海第二医科大学附属瑞金临床医学院检验系 上海200025
(吴洁敏)，上海第二医科大学附属瑞金临床医学院检验系 上海200025(倪培华) |
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| 摘 要： | 目的 对结核分枝杆菌的ESAT - 6基因进行克隆、鉴定与表达 ,为结核病的诊断、重组疫苗的应用打下基础。方法 以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板 ,用聚合酶链反应 (PCR)对ESAT - 6基因进行扩增 ,将扩增的产物连接于测序载体 pGEM T上 ,经测序反应确定无误后 ,再将PCR产物与原核表达载体pET4 2b(+)构建表达ESAT - 6的重组质粒 ,将重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒 ,经酶切鉴定后 ,再转化入表达宿主大肠杆菌BL2 1菌株内 ,对转化菌株进行诱导后 ,破菌 ,进行SDS -PAGE电泳。结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白 ,其表达的蛋白质相对分子质量为 990 0。结论 目的基因克隆到菌株内 ,重组结核分枝杆菌ESAT - 6的成功表达为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测等奠定了基础
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 原核表达载体 克隆 表达 |
The cloning and expression of ESAT-6 gene from Mycobacterium tuberculosis |
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| JIN Lei,WU Jiemin,NI Peihua.The cloning and expression of ESAT-6 gene from Mycobacterium tuberculosis[J].Shanghai Journal of Medical Laboratory Sciences,2004(4). |
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| Authors: | JIN Lei WU Jiemin NI Peihua |
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| Institution: | JIN Lei,WU Jiemin,NI Peihua.Department of Clinical Laboratory,Shuguang Hospital,Shanghai Traditional Chinese Medical University,Shanghai 200021,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis Prokaryotic expression vector Clone Expression |
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