| T6-17细胞培养上清中肿瘤蛋白P185的表达 |
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| 作者姓名： | 王弦 谢小强 曹亮 徐振山 宋礼华 |
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| 作者单位： | 1. 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,安徽,合肥,230032
2. 安徽大学生命科学学院,安徽,合肥,230039
3. 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司,安徽,合肥,230088 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的:从转染Her-2/neu基因的T6-17细胞上清中纯化p185蛋白, 研究其免疫原性和探究其在血清学诊断中应用的可能性.方法:采用溴化氰活化的Sepharose 4B为基质, 通过交联A18 mAb, 用亲和层析的技术纯化p185 蛋白.将收集的T6-17细胞上清循环过亲和层析柱, 经梯度盐溶液解离与抗体结合的p185 蛋白, 收集到蛋白洗脱峰, 浓缩后用ELISA检测p185的免疫反应性, 并经SDS-PAGE和Western blot 进一步鉴定.结果:ELISA检测p185保持了良好的与抗体反应活性, SDS-PAGE和Western blot进一步证实纯化蛋白的相对分子质量(Mr)约为185 000, 是HER-2/neu编码的肿瘤抗原.结论:从转基因细胞上清中成功获取p185肿瘤抗原, 可进一步用于乳腺癌的实验室诊断研究.
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| 关 键 词： | 单克隆抗体 肿瘤蛋白 免疫亲和层析 |
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