| 摘 要： | 目的探讨三七总皂苷(PNS)对自然衰老大鼠睾丸炎症反应和生殖细胞凋亡的影响。方法将SPF级SD大鼠随机分为9月龄组(9M),24月龄组(24M),PNS低、中、高剂量组,每组10只。大鼠从18个月开始,PNS低、中、高剂量组分别灌胃给予PNS 10,30,60 mg·kg^(-1),灌胃至24个月,每周灌胃6 d,周日停1 d,连续灌胃6个月。末次给药并禁食不禁水12 h后,处死大鼠,迅速取出睾丸组织。苏木精-伊红(HE)染色法观察睾丸组织形态学变化,Western Blot检测睾丸组织中P21^(WAF1/CIP1)(P21)、核转录因子(NF-κB)以及下游炎症因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧化酶2(COX2)蛋白的表达和凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生殖细胞凋亡。结果 HE染色观察发现,与9M比较,24M大鼠睾丸生精小管形态结构发生明显变化,生精细胞层数减少,细胞稀疏,各级生精细胞脱落。与24M比较,PNS低、中、高剂量组均能在一定程度上改善睾丸组织生精小管结构形态。与9M比较,24M大鼠睾丸组织P21、NF-κB及其下游炎症因子IL-1β、TNF-α、COX2的表达显著上调(P<0.01),PNS低、中、高剂量组可显著下调其表达(P<0.05,P<0.01)。24M大鼠睾丸组织抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著降低(P<0.01),促凋亡蛋白Bax显著升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01),PNS可显著升高Bcl-2的表达,降低Bax的表达,升高Bcl-2/Bax比值(P<0.05,P<0.01);与9M比较,24M大鼠睾丸内凋亡阳性细胞数显著增多,PNS低、中、高剂量组可明显减少凋亡的阳性细胞数。结论 PNS能够抑制自然衰老大鼠睾丸炎症反应,显著减少睾丸生殖细胞凋亡。
|
