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RhoA/mDial参与LPS诱导肺微血管内皮细胞表达p-ERM北大核心CSCD
引用本文:刘雪婷孙耕耘尤青海费黎明.RhoA/mDial参与LPS诱导肺微血管内皮细胞表达p-ERM北大核心CSCD[J].中华急诊医学杂志,2017(3):272-277.
作者姓名:刘雪婷孙耕耘尤青海费黎明
作者单位:1.安徽医科大学第一附属医院呼吸内科230022;
基金项目:国家自然科学基金(81370170,81100053)
摘    要:目的探讨脂多糖(LPS)是否影响大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)磷酸化埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白(p-ERM)的表达及与RhoA/mDial的关系。方法于安徽医科大学第一附属医院呼吸内科实验室,取购自安徽省实验动物中心的健康雄性、体质量100—120g、SPF级sD大鼠的肺脏,体外培养PMVEC,随机(随机数字法)分为量效组、时效组和干预组(1μg/mL RhoA抑制剂(C3transferase)与PMVEC预孵育240min再加入10μg/mL的LPS继续孵育30min),Western印迹检测ERM、p-ERM及mDial表达量。多组变量间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD—t检验方法分析,以P〈0.05为差异有统计学意义。结果PMVEC中均表达ERM、P—ERM及mDial。量效组p-ERM和mDial表达随LPS浓度(0、0.1、1、10μg/mL)增加而升高:p-ERM为(0.520±0.101)、(0,657±0.092)、(0.891±0.167)、(1.227±0.106),0μg/mL组与0.1μg/mL组比较,P〉0.05,其余P〈0.01;mDial为(0.200±0.102)、(0.430±0.121)、(0.603±0.154)、(0.887±0.204),0.1μg/mL组与1μg/mL组比较,P〉0.05;其余P〈0.05。时效组p-ERM表达量于15min开始上升(0.670±0.149),30min出现高峰(1.175±0.103),之后下降,60min(0.959±0.189),90min(0.842±0.129),120min仍持续较高水平(0.767±0.097),表达量均高于对照组(0.471±0.157),差异具有统计学意义(15min组与120min组比较、60min组与90min组比较及90min组与120min组比较,P〉0.05;其余P〈0.05);mDial表达量于15min开始上升(0.779±0.035),30min达高峰(0.889±0.036),之后下降,60min(0.648±0.019),90min(0.582±0.068),120min仍持续较高水平(0.526±0.059),均高于对照组(0.284±0.118),差异有统计学意义(均P〈0.01)。C3transferase能显著下调LPS诱导的p-ERM的表达对照组:(0.339±0.069);C3+LPS组:(0.438±0.07);C3组:(0.352±0.071);LPS组:(0.634±0.191);C3+LPS组与LPS组比较,P〈0.01],mDial也被C3transferase抑制对照组:(0.449±0.122);C3+LPS组:(0.380±0.148);C3组:(0.404±0.164);LPS组:(0.622±0.174);C3+LPS组与LPS组比较P=0.00]。结论LPS诱导大鼠PMVEC内p-ERM表达增加,C3transferase抑制RhoA/mDial信号通路后使其表达下调。

关 键 词:脂多糖  肺微血管内皮细胞  埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白  炎症  急性呼吸窘迫综  合征  RhoA/mDial
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