| 重组SARS-CoV刺突蛋白基因片段的原核表达及纯化 |
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| 引用本文： | 蒲丹,宋文鑫,闫歌,张秉强,唐霓,王丕龙,郑建,黄爱龙.重组SARS-CoV刺突蛋白基因片段的原核表达及纯化[J].重庆医科大学学报,2004,29(4):409-412. |
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| 作者姓名： | 蒲丹 宋文鑫 闫歌 张秉强 唐霓 王丕龙 郑建 黄爱龙 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010;重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010;重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010;重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010;重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010;重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010;重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010;重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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重庆市科委科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:冠状病毒(SARS-CoV)的刺突蛋白(spike glycoprotein,S蛋白)是病毒的主要结构蛋白之一,也是重要的病毒抗原,重组S蛋白的表达可用于检测病毒感染后血清抗体.方法:根据抗原性预测分析结果,将S蛋白中抗原决定簇的编码基因重新拼接成两个新的基因,通过全基因合成方式直接合成至原核表达载体pET32a( ),转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,Ni-NTA试剂盒纯化目的蛋白.结果:SDS-PAGE证实重组S蛋白的表达,并被纯化.结论:重组刺突蛋白的表达及纯化,可做为检测SARS-CoV抗体的抗原,有助于进一步开展SARS-CoV相关研究.
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| 关 键 词： | SARS-CoV 刺突蛋白 表达 纯化 |
| 文章编号： | 0253-3626(2004)04-0409-04 |
| 修稿时间： | 2003年10月28日 |
Over-expression and purification of recombinant spike protein fragment of SARS coronavirus |
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| PU Dan,et al.Over-expression and purification of recombinant spike protein fragment of SARS coronavirus[J].Journal of Chongqing Medical University,2004,29(4):409-412. |
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| Authors: | PU Dan |
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| Abstract: | Objective:To obtain the spike glycoprotein(S protein) of SARS coronavirus (SARS-Cov) for detection of the corresponding antibody and preparation of diagnostic kits.Methods:Genes encoding S protein were picked out to form a new gene and divided into two parts according to the prediction of antigenicty.They were obtained by nucleotide synthesis and were cloned into expression vector pET32a( ) respectively.Proteins then were induced by IPTG and purified through Ni-NTA.Results:Target proteins were successfully expressed and purified.Conclusion:The recombinant S proteins of SARS-CoV could be of great help in diagnosing the disease and investigating the virus further. |
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| Keywords: | SARS coronavirus Spike protein Expression Purification |
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