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人肝癌细胞系Slit/Robo启动子甲基化状态及基因表达的研究
引用本文:郑丹,刘彬彬,刘银坤,康晓楠,孙璐,郭坤,孙瑞霞,陈洁,赵燕. 人肝癌细胞系Slit/Robo启动子甲基化状态及基因表达的研究[J]. 中华肝脏病杂志, 2009, 17(3). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2009.03.010
作者姓名:郑丹  刘彬彬  刘银坤  康晓楠  孙璐  郭坤  孙瑞霞  陈洁  赵燕
作者单位:1. 上海复旦大学附属中山医院肝癌研究所,200032
2. 上海复旦大学生物医学研究院癌症研究中心
摘    要:目的 研究Slit/Robo信号通路相关基因Slit1、Slit2、Slit3和Robo1、Robo3在多种人肝癌细胞系中的表达及甲基化状态,探讨与肝癌发生和发展的关系. 方法提取9种人肝细胞癌细胞株(Hep3B、HepG2、PLC/PRF/5/PRF/5、SMMC-7721、BEL-7402、MHCC97-H,MHCC97-L、LM3、LM6)及对照细胞株L02的基因组DNA和总RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应技术和甲基化特异性聚合酶链反应技术检测Slit1、Slit2,Slit3和Robo1,Robo3基因的基因表达水平与启动子甲基化状态.实验数据应用Paired t检验. 结果 Slit1、Slit2、Slit3基因除个别细胞株外,在不同转移潜能细胞株中均发生了DNA甲基化,同时Slit1和Slit3在mRNA水平几乎均不表达,Slit2基因表达程度在不同转移潜能的细胞株之间存在差异,随着转移潜能的增加表达大致呈下降趋势.作为Slit2受体的Robo1基因在10株肝癌细胞株中均发生甲基化修饰,但除在SMMC-7721、BEL-7402、L02不表达外,其余7种细胞株均有表达.Robo3基因相关CpG岛在9种肝癌细胞株中均未发生甲基化,同时其在mRNA水平均无表达. 结论 Slit/Robo可能在肝癌发生和发展中发挥作用.而Robo3则在肝癌中不发生表达而且其表达沉默可能不受甲基化方式调控.

关 键 词:癌,肝细胞  甲基化  基因表达  CpG岛  细胞系

Analysis of the expression of Siit/Robo genes and the methylation status of their promoters in the hetpatocellular carcinoma cell lines
ZHENG Dan,LIU Bin-bin,LIU Yin-kun,KANG Xiao-nan,SUN Lu,GUO Kun,SUN Rui-xia,CHEN Jie,ZHAO Yan. Analysis of the expression of Siit/Robo genes and the methylation status of their promoters in the hetpatocellular carcinoma cell lines[J]. Chinese journal of hepatology, 2009, 17(3). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2009.03.010
Authors:ZHENG Dan  LIU Bin-bin  LIU Yin-kun  KANG Xiao-nan  SUN Lu  GUO Kun  SUN Rui-xia  CHEN Jie  ZHAO Yan
Abstract:
Keywords:Carcinoma,hetpatocellular  Methylation  Genes expression  CpG islands  Cell line
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