兔抗mLAIR-1胞外区抗体的制备、纯化和鉴定

目的：表达并纯化小鼠白细胞相关免疫球蛋白样受体-1（mLAIR-1）胞膜外区与人IgG Fc段的融合蛋白，制备兔抗mLAIR-1胞膜外区的抗体．方法：构建真核表达载体，表达并纯化mLAIR-1-Fc融合蛋白．以mLAIR-1-Fc融合蛋白免疫家兔，用偶联mLAIR-1-Fc融合蛋白的Sepharose-4B亲和层析柱纯化多克隆抗体．用间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定多克隆抗体的特异性．结果：表达并纯化了mLAIR-1-hIgFc融合蛋白．以其免疫家兔，用亲和层析的方法纯化得到兔抗mLAIR-1胞膜外区的抗体，能与转染细胞和细胞表面天然mLAIR-1分子结合．结论：成功地构建了mLAIR-1胞膜外区基因的真核表达载体，表达并纯化了mLAIR-1-Fc融合蛋白．用偶联mLAIR-1-Fe融合蛋白的Sepharose-4B亲和层析柱纯化的兔抗mLAIR-1胞外区抗体，具有高特异性和高效价，为进一步研究mLAIR-1分子的结构和功能提供了新的手段．