大鼠CD4~＋CD25-T细胞的Foxp3基因转染及其表达

背景：调节性T细胞在维持机体免疫应答稳态和免疫耐受方面具有非常重要的作用,但外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞含量极低,且增殖能力较差。目的：以携带Foxp3基因的慢病毒EGFP＋载体转染大鼠CD4＋CD25-T细胞,观察其在大鼠CD4＋CD25-T细胞中的表达。方法：以免疫磁珠两步法分选大鼠CD4＋CD25-T细胞,用携带大鼠Foxp3基因的慢病毒载体体外转染分选的细胞,以转染Foxp3基因的CD4＋CD25-T细胞为实验组,EGFP空白质粒组及CD4＋CD25-T细胞为阴性对照组,CD4＋CD25＋T细胞为阳性对照组。荧光显微镜和RT-PCR分别从蛋白和mRNA水平检测Foxp3基因的表达。结果与结论：成功完成了免疫磁珠的分选,获得了纯度较高的CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋T细胞,细胞存活率为（94±2）%,慢病毒转染的CD4＋CD25-T细胞高表达Foxp3基因。表明以携带Foxp3基因的慢病毒载体系统可有效介导Foxp3基因在大鼠CD4＋CD25-T细胞中高表达。