| miR-1271-5p在肾细胞癌组织和细胞中的表达及其对A-498 细胞增殖及凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 王勇,郭永连,陈琳,李国灏,应诚诚,程薇.miR-1271-5p在肾细胞癌组织和细胞中的表达及其对A-498 细胞增殖及凋亡的影响[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2018,25(1):40-44. |
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| 作者姓名： | 王勇 郭永连 陈琳 李国灏 应诚诚 程薇 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院a. 附属武汉中心医院泌尿外科，湖北武汉430014；b.附属梨园医院耳鼻喉科，湖北武汉430077,华中科技大学同济医学院a. 附属武汉中心医院泌尿外科，湖北武汉430014；b.附属梨园医院耳鼻喉科，湖北武汉430077,华中科技大学同济医学院a. 附属武汉中心医院泌尿外科，湖北武汉430014；b.附属梨园医院耳鼻喉科，湖北武汉430077,华中科技大学同济医学院a. 附属武汉中心医院泌尿外科，湖北武汉430014；b.附属梨园医院耳鼻喉科，湖北武汉430077,华中科技大学同济医学院a. 附属武汉中心医院泌尿外科，湖北武汉430014；b.附属梨园医院耳鼻喉科，湖北武汉430077,华中科技大学同济医学院a. 附属武汉中心医院泌尿外科，湖北武汉430014；b.附属梨园医院耳鼻喉科，湖北武汉430077 |
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| 基金项目： | 湖北省自然科学基金资助项目（No.2017CFB176） |
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| 摘 要： | 目的:探讨miR-1271-5p 在肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）组织和细胞系中的表达及其对RCC细胞株A-498 增殖及凋亡的影响。方法：用实时荧光定量PCR（qPCR）检测手术切除并经病理确诊为RCC组织和癌旁组织，以及RCC细胞系ACHN、A498、HK-2、786-O、CaKi-1 和人胚肾细胞株HEK293 中miR-1271-5p 的表达水平。用miR-1271-5p（实验组）和miR-NC（对照组）分别转染A-498 细胞。通过生物信息学预测鸟嘌呤交换因子DOCK1 为miR-1271-5p 可能的靶基因，构建DOCK1 基因的3’UTR 野生型及突变体序列双荧光素酶报告基因载体并进行荧光素酶活性检测，qPCR检测两组细胞中DOCK1 mRNA表达水平，Western blotting 检测两组细胞中DOCK1、p-ERK、p-AKT、Bcl-2 和Bax蛋白的表达情况，MTS法、集落形成实验和流式细胞术检测A-489 细胞增殖、集落形成数目和凋亡情况。结果：RCC组织和细胞系中miR-1271-5p 表达水平显著低于癌旁组织和人胚肾HEK293 细胞（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因系统结果显示DOCK1 是miR-1271-5p 的靶基因(P<0.01)。与miR-NC组细胞相比，miR-1271-5p 组A-498 细胞中DOCK1 mRNA的表达水平显著下降(P<0.01)；DOCK1、p-ERK、p-AKT、Bcl-2 蛋白表达水平显著下调(P<0.05)，Bax 蛋白明显上调(P<0.05)；A-498 细胞增殖活力显著降低(P<0.01)；集落形成数显著减少(P<0.05)；细胞凋亡率显著增高(P<0.01)。结论：RCC组织和细胞系中miR-1271-5p 表达下调，通过干扰DOCK1 基因表达能明显抑制A-489 细胞的增殖及诱导其凋亡，miR-1271-5p 可能成为未来RCC治疗的分子靶标。
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| 关 键 词： | 肾细胞癌 miR-1271-5p DOCK1 基因 增殖 凋亡 |
| 收稿时间： | 2017/10/30 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/12/3 0:00:00 |
Expression of miR-1271-5p in renal cell carcinoma and its effect on proliferation and apoptosis of A-498 cells |
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| WANG Yong,GUO Yonglian,CHEN Lin,LI Guohao,ING Chengcheng and CHENG Wei.Expression of miR-1271-5p in renal cell carcinoma and its effect on proliferation and apoptosis of A-498 cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2018,25(1):40-44. |
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| Authors: | WANG Yong GUO Yonglian CHEN Lin LI Guohao ING Chengcheng and CHENG Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | renal cell carcinoma miR-1271-5p DOCK1 gene proliferation apoptosis |
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